厚朴叶的化学成分初步研究

　　厚朴Magnolia officinalis Rehd. et Wils.为常用中药，始载于《神农本草经》，其后历代本草和《中国药典》历有记载。通过文献查考，我国历代主要本草所载正品厚朴其药用部位均为树皮，古今均未见有叶入药的记载。如能将叶开发利用，将有利于厚朴药材资源的综合利用和可持续利用，且会产生很大的经济效益和社会效益。前期我们已对厚朴叶进行了急性毒性试验，并参照厚朴的主要功效进行了药效学研究，发现厚朴叶石油醚提取部位、乙醚提取部位、水提液部位具有一定的活性[1]。厚朴叶目前尚未见到相关化学成分的研究报告。作者从厚朴叶上述三个部位分离得到9 个化合物，其中7 个化合物经理化及光谱分析，结合文献对照，鉴定为为棕榈酮(Ⅰ)、花生酸(Ⅱ)、二十六烷醇 (Ⅲ)、β－谷甾醇(Ⅳ)、胡萝卜苷(Ⅴ)、槲皮苷(Ⅵ)、芦丁(Ⅶ)，均为首次从该植物中分离得到。
　　1 实验部分
　　1.1 仪器与试药
　　VG7070E 型EI 源质谱仪；NICOLET MX-1E 型傅立叶变换红外光谱仪；NMR 测定用Bruck 核磁共振仪(600 MHz)；SGWRX-4 型显微熔点测定仪 (温度未校正)；DL－360 超声清洗仪；薄层层析和柱层析用硅胶为青岛海洋化工厂产品；其余试剂均为分析纯。
　　厚朴叶由成都中医药大学卫莹芳教授和作者自2005 年10 月1 日～20 日从都江堰市虹口乡采集，经卫莹芳教授鉴定为木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd. et Wils.的干燥叶。
　　凭证标本保存于成都中医药大学。
　　1.2 化合物的提取与分离
　　取干燥厚朴叶5kg ,剪碎,室温下用95％乙醇30kg 渗漉（7d×3），回收溶剂，浓缩，得105g 提取物。将总提物与柱层析硅胶（100～200 目）拌匀后,置索氏提取器中,依次用石油醚、乙醚和甲醇回流提取。将提取得石油醚部分浸膏上200～300 目硅胶，以石油醚-乙酸乙酯体系（20:1～3:2）洗脱，纯化得化合物Ⅰ, Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ；乙醚部分浸膏上200～300 目硅胶，以石油醚-乙酸乙酯体系（5:1～0:1）洗脱，纯化得化合物Ⅵ,甲醇部分浸膏上200～300目硅胶，以氯仿-甲醇体系（100:1～0:100）洗脱，纯化得化合物Ⅶ,Ⅷ。（已增补提取分离过程） 1.3 结构鉴定
　　1. 3. 1 化合物Ⅰ的鉴定
　　白色雪片状结晶（石油醚），mp82℃-83℃。IR(KBr)υmaxcm-1:2954.7,2917.5 2848.6,2870.8(CH3CH2),1705.1(C=O),718.4 [ρ(CH2)n≥4],1462.5(δ-CH2-)。EI-MS m/z:450[M]+,255，239(100), 183,156,125,96,83,57,43。
　　1H-NMR(CDCl3): δ＝0.88（t,J=7.2Hz,H-1）,1.25(bs,H2-H13),1.55(m,H-14),2.38(t,J=7.4Hz,H-15)，数据与文献[2]对照，确定为棕榈酮（palmitone）
　　1. 3. 2 化合物Ⅱ的鉴定
　　白色粉末（丙酮），易溶于石油醚、丙酮。mp73℃-75℃, IR(KBr)υmaxcm-1:2918,2849(CH3CH2), 1704(C=O),1463( δ -CH2-),720[ ρ (CH2)n ≥ 4] 。1H-NMR(CDCl3) δ :0.88（t,J=6.96,H-1），1.64（2H，t）,1.30［m,32H, (CH2)16］，2.34（2H,ｔ，J＝7.5Hz） ，数据与文献[3]对照，确定为花生酸（arachidic acid）
　　1. 3. 3 化合物Ⅲ的鉴定
　　白色粉末（丙酮），mp℃79-81℃, IR(KBr)υmaxcm-1:2954.7，2916.7，2848.5(CH3CH2),1462.0(δ-CH2-)，718.7 [ρ(CH2)n≥4]。1H-NMR(CDCl3)δ:0.88（t,J=7.02Hz,H-1），1.09－1.45［m,46H, (CH2)23］1.57（2H，t）,3.629（2H,ｔ，J＝6.6Hz），数据与文献[4]对照，确定为二十六烷醇（1-hexacosanol）。
　　1. 3. 4 化合物Ⅳ的鉴定
　　白色针晶，mp137-139℃(乙醇),Liebermann-Burchard 反应阳性，,与β－谷甾醇标准样品对照Rf 值一致,混合熔点不下降，确定为β－谷甾醇（β-sistosterol）。
　　1. 3. 5 化合物Ⅴ的鉴定
　　白色颗粒结晶，mp292-295℃（乙酸乙酯）。Liebermann-Burchard 反应阳性，,与胡萝卜苷标准样品对照Rf 值一致,混合熔点不下降，确定为胡萝卜苷（daucosterol）。
　　1. 3. 6 化合物Ⅵ的鉴定
　　深黄色颗粒（甲醇），溶于甲醇、水，mp182℃-183℃。盐酸－镁粉反应阳性，Moish反应阳性。IR(KBr)υmaxcm-1 :3284，1653，1605，1506，1456。EI-MS m/z:302(苷元，100)，301，273，153。ESI-MS m/z:449[M +H] +, 447[M -H] +,303[苷元 ＋H]。1H-NMR(DMSOd6)δ :7.36 （ 1H ， dd,J=2Hz,8Hz,6 ’ -H ） ,7.20(1H,d,J=2Hz,2 ’ -H),6.96(1H,d,J=8Hz,5 ’
　　-H),6.23(1H,d,J=2Hz,8-H),6.41(1H,d,J=2Hz,6-H),5.43(1H,d,J=2Hz,1"-H),0.98(3H,d,J=9Hz,CH3),3.07-3.95(4H,m,2",3",4",5"-H)。数据与文献[5]对照，确定为槲皮苷（quercitrin）。
　　1. 3. 7 化合物Ⅶ的鉴定
　　黄色无定形粉末（甲醇），溶于甲醇、水，mp195℃－197℃（甲醇）。盐酸－镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄色荧光，Monish 反应阳性。IR(KBr)υmaxcm-1 :3423 (OH) ,1655C=O),1601 ,1506 ,1457 (苯环),1362 ,1296 ,1203 cm－1 1H-NMR(DMSO－d6)δ:12.57（1H，s,C5-OH ） , 10.91(1H,s,C7-OH),9.75(1H,s,C4'-OH),9.25(1H,s,C3'-OH),7.55(2H,m,C2',6'-OH),6.84(1H,d,J=9.0Hz,C5'-OH,6.36(1H,d,J=1.9Hz,C8-H),6.17(1H,d,J=1.9Hz,C6-H),5.33(1H,d,J=7.2Hz,C1-OH),4.38(1H,s,C1'-OH),3.30-3.49(16H,m,sugarprotons) ， 0.99 （ 3H,d,J=6.1Hz,C6"-CH3 ） 。
　　13C-NMR(DMSO-d6) δ:156.9（C-2），133.6（C-3），177.7（C-4），161.4（C-5），99.2（C-6），164.4（C-7），93.7（C-8），156.8（C-9），104.3（C-10），121.5（C-1"），115.6（C-2’），148.6（C-3’），144.9（C-4’），116.6（C-5'），121.6（C-6’）101.5（C-1"），74.3（C-2"），76.6（C-5"），67.7（C-6"），100.9（C-1'''），70.6（C-2'''），70.3（C-3'''），72.2（C-4'''），68.5（C-5'''），18.0（C-6'''），数据与文献[6]对照，确定为芦丁（rutin）。
　　2 讨论部分
　　厚朴为高大乔木，根系发达，对水土保持和生态平衡起到很大的作用，现砍树剥皮药用与林业、生态环境保护产生了矛盾。厚朴叶资源十分丰富，而且每年可以再生。现今国内大量厚朴叶未加以利用，仍其凋落腐烂，造成资源的浪费，厚朴资源的综合利用研究就显得十分必要和迫切。
　　作者已从厚朴叶中分离鉴定几个化合物中，棕榈酮具有抗痉挛、并可能有抗焦虑等作用。
　　这个脂肪酮能显着降低由戊四唑引起小鼠的阵挛程度和毒性，同时它能延长由对氨基吡啶(4-AP)和荷包牡丹碱(BIC)引起的痉挛发作时间并能降低其引起的死亡率[2][7]二十六烷醇具有安全有效的保护神经和营养神经的活性，在防治阿兹海默病(AD)等神经退行性疾病中的细胞损失方面很有应用前景，已在老年神经病学研究领域中引起了人们的重视[8]；芦丁和槲皮苷这两种黄酮是天然的抗氧化成分，并对心血管等疾病有较好疗效。本研究为厚朴药材资源的综合利用开发提供了科学依据。