关于中药香附化学成分的研究工作

　　香附(Rhizoma Cyperi) 为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎，始载 于《名医别录》,《中国药典》自1985 年版开始收载。性平，味辛、微苦、甘,是临床常用 妇科良药，具有疏肝理气、调经止痛之功效，广泛用于肝郁气滞所致之胸胁及脘腹胀痛、消化 不良、月经不调、经闭痛经、寒疝腹痛、乳房胀痛等病证[1]。香附的药理作用非常广泛, 主 要有松弛内脏平滑肌促进胆汁分泌、抑制子宫收缩、抗炎镇痛和雌激素样等作用并可以抑制 NO 和超氧化物的产生[2,3]，近年发现香附还有抑制乙酰胆碱酯酶活性抗糖尿病等作用 [4,5]。
　　香附均为野生，主产于山东、浙江、湖南、河南等地。香附化学成分的研究主要集 中在挥发油, 研究表明香附挥发油中含有多种单萜、倍半萜及其氧化物。薄层鉴别反应 显示香附还含有甙类、黄酮类、酚类和三萜类化合物，但未见文献报道相关化合物的分离鉴 定[2]。为了研究除挥发油以外成分，我们对其乙醇提取物的化学成分进行了研究[6,7]，本文 报道从中分离鉴定的6 个化合物， 分别为(+)-δ-cadinol (1)， 原儿茶酸 (protocatechuic acid，2)，二十四烷酸 (n-lignoceric acid， 3)，二十六烷酸 (n-hexacosnic acid，4)，β- 谷甾醇 (β-sitosterol，5)，胡萝卜甙 (daucosterol， 6)。其中1-4 为首次从该属植物中分离得到。
　　1 仪器和材料
　　Fisher-Johns 熔点仪（温度计未校正），Zabspec E 型质谱仪，Esquire-LC 00054 型质谱仪，Bruker AM500 核磁共振仪，层析用硅胶和高效薄层板均为青岛海洋化工厂产品 ，Sephadex LH-20 (Pharmacia)，HPD-400 大孔吸附树脂（沧州宝恩化工有限公司） ，所用试剂均为分析纯（北京化工厂）。
　　2 提取和分离
　　莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎15 Kg，粉碎后用10 倍量95%乙醇 加热回流提取三次，将提取液在减压下浓缩后的流浸膏1.5 Kg， 再将浸膏分散与热水中 ， 依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取， 得到石油醚部分126 g， 二氯甲烷 部分158g，乙酸乙酯部分105 g， 正丁醇部分190 g。石油醚部分经硅胶柱层析，石油醚-乙 酸乙酯梯度洗脱（100：0-10：1），经薄层检测合并得7 个部分，第3 份经硅胶柱层析， 石油醚-乙酸乙酯（20：1）纯化得到化合物5（30 mg），第4 份重结晶得到化合物3 （10 mg），从第5 份经硅胶柱层析，石油醚-二氯甲烷（10：1）分离纯化得到4（40 mg）。二 氯甲烷部分经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱 (50:1- 0:1)，经薄层检测合并得8 份， 第 4份经硅胶柱层析，石油醚：丙酮（10:1）纯化得化合物1（8mg）。第 7 份析出沉淀 ，重结晶得化合物6（50 mg）。第8 份经硅胶柱层析，二氯甲烷-甲醇（10:1） 分离纯化 得到化合物2（8 mg）。
　　3 结构鉴定
　　(+)-δ-cadinol (1), 白色针状结晶, mp 150-152 °C。1 H NMR (600 MHz, CD3OD) δ: 0.86(3H,d,J=7.2Hz， CH3-13)， 0.89 (3H, d, J=6.6Hz, CH3-12)，1.17 (3H, s,CH3-15) ， 1.77 (3H,s,CH3-14)，5.75 (1H， dd，J = 5.4, 0.6Hz, H-5), 2.36 (1H, dt, J = 11.4, 5.4 Hz, H-6),1.83 (1H, dt,J = 13.8, 2.4 Hz, H-1), 1.23(1H, dt, J = 11.4, 3.0Hz, H-7)；13C NMR (150 MHz, CD3OD) δ: 40.8(C-1), 31.7 (C-2), 68.9 (C-3), 135.3 (C-4), 130.4 (C-5), 35.9 (C-6), 44.0 (C-7), 20.3 (C-8), 35.4(C-9), 72.6 (C-10), 28.3 (C-11), 21.9 (C-12), 15.9 (C-13), 21.4 (C-14), 29.3 (C-15)。以上光谱数据与文献[8] 报道的(+)-δ-cadinol 一致。
　　原儿茶酸 (protocatechuic acid，2)， 白色针晶 (氯仿:甲醇)， mp 197-199°C ， 易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂。1H NMR (600 MHz, CD3OH) δ: 6.78 (1H, d, J = 7.8Hz, H-5), 7.42 (1H,dd, J = 8.0, 2.0 Hz, H-6), 7.43 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2)；13C NMR (125 MHz, CD3OD) δ: 123.1(C-1), 117.7 (C-2), 146.0 (C-3), 151.5 (C-4), 115.7 (C-5), 123.8 (C-6), 170.2 (COOH)。以上数据与文献[9]报道的原儿茶酸一致。
　　二十六烷酸 (n-hexacosnic acid，3)，白色针晶(石油醚:乙酸乙酯)，mp 79-81°C 。EI-MS m/z:
　　397, 383, 369, 354, 340, 326, 298, 241, 199, 185, 171, 157, 143, 129, 115 。1H NMR (600 MHz,CDCl3) δ: 0.87 (3H, t, J = 7.2Hz, H-26), 2.35 (2H, J = 7.2Hz, H-2), 1.64(2H, m, H-3), 1.25 (44H,m, (CH2)22)。以上数据与文献[10]的二十六烷酸一致。
　　二十四烷酸 (n-lignoceric acid，4)，白色无定型结晶 (石油醚:乙酸乙酯)， mp 58-60°C。
　　EI-MS m/z: 369, 354, 340, 326, 298, 241, 199, 185, 171, 157, 143, 129, 115；1H NMR (600 MHz,CDCl3) δ: 0.88 (3H, t, J = 7.2 Hz, H-24), 2.35 (2H, J = 7.2Hz, H-2), 1.64 (2H, m, H-3), 1.26 (40H,m, (CH2)20)。以上数据与文献[11]的二十四烷酸一致。
　　β-谷甾醇 (β-sitosterol，5)，白色针晶(石油醚:乙酸乙酯)，mp 140-142 °C， 易溶于石油醚、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂。浓硫酸香草醛喷雾烘烤显紫红色。IR νmax (KBr) cm-1: 3429(羟基), 1633(双键), 1464, 1062, 958。其红外光谱数据、TLC 上Rf 值与β-谷甾 醇对照品一致,且与对照品混合熔点不下降。
　　胡萝卜甙 (daucosterol，6)， 白色粉末(氯仿:甲醇)，mp>300°C， 难溶于大多数 的有机溶剂， 能溶于氯仿和甲醇的混合溶剂。浓硫酸香草醛喷雾烘烤显紫红色。IRνmax (KBr)cm-1:
　　3419 (羟基), 1645 (双键), 1461, 1377, 1074, 1024。其红外光谱数据、TLC 上 Rf 值与β-胡萝卜甙对照品一致，且与对照品混合熔点不下降。