中药复方栓剂治疗阴道炎抗炎机理的研究

　　0 引言
　　
　　正常健康妇女的阴道从生理学角度上讲是一个闭合的体腔，对外界有好的屏障保护作用。但是由于多种原因（如病原体的侵入，机械，化学物质）致阴道内微环境破坏，使得阴道自然防御功能受到破坏，这样病原体就容易侵入而导致发生阴道炎症。临床上常见的阴道炎有滴虫性阴道炎、霉菌性阴道炎、非特异性阴道炎、老年性阴道炎，婴幼儿性阴道炎等。阴道炎一般病情缠绵，反复发作，不易速愈，且常并发月经不调、闭经、不孕等疾病，是妇科领域中仅次于月经病的常见病[1]。
　　祖国医学中,阴道炎这样的病名并不存在，但是根据阴道炎在临床上的表现，可以将其归于“带下病”的范畴。《傅青主女科》指出：“夫带下俱是湿证”。《女科经纶》引刘海间说：“带下由下部任脉湿热甚，津液涌溢而为带下”。《妇人大全良方》日：“妇人阴内痛痒，不时出黄水，食少体倦，此肝脾气虚，湿热下注”。《灵枢·痈疽篇》说：“热胜则肉腐，肉腐则为脓”。由此可见，祖国医学认为，带下病的主要发病机理是肝，肾，脾功能失调，水湿不运，湿热互结，流注下焦所致。
　　目前对于阴道炎治疗多采用全身抗炎加局部抗炎治疗。主要是运用抗生素及其抗真菌药，此法虽能暂时杀灭细菌，寄生虫或是真菌，但常引起阴道内正常菌群失调而致久治难愈的霉菌性阴道炎，并且有其副作用，患者可伴有皮疹、恶心、胃肠不适、中毒性肝炎等不良反应。所以针对这些问题，对于反复发作的阴道炎的治疗就要求开创一些毒副作用小，作用持久，给药方便的药物出来。
　　近年来，中医药在治疗阴道炎方面已经取得了很大的进展，由于本病局部症状明显，因此主要采用外治为主，?治为辅，并已经开发出了不少剂型，如冲洗、熏洗、栓剂、纳药、散剂、胶囊及药垫等，且中药制剂着重于整体调节，疗效显著，无明显毒副作用，安全、简便、价廉、临床应用广泛等优点，显示了良好的社会效益与经济效益。
　　中药复方栓剂是由苦参，黄柏等组成，具有清热燥湿，杀虫止痒，祛腐生肌，收湿敛疮的功效。用于妇女湿热带下，症见阴部瘙痒，带下量多，色黄或如豆渣状。针对的主要病机是是“湿热蕴阻下焦”，这正与临床上阴道炎主要病机是相通的，因此认为本药对于阴道炎是针对病机治疗的，并且在剂型上选择栓剂，达到了阴道炎局部治疗对药物的要求。从以前的研究中已经证实了此中药复方的抗炎作用，但是未对其抗炎作用的发挥作深入的研究，本文就这一方面做出探究，为在此中药复方在临床上的应用提供可靠的机理依据。
　　
　　1 对苯酚胶浆所致的大鼠阴道宫颈组织中PGE2 含量的影响
　　
　　1.1 试验方法
　　1.1.1 25%苯酚胶浆的配制
　　取苯酚 5ml，西黄蓍胶1g，甘油4ml，加蒸馏水至20ml，配成含25%苯酚胶浆。
　　0.5mol/L KOH－甲醇溶液的配制：精密称取KOH5.6g，将其融化于甲醇200 ml 中，备用。
　　1.1.2 大鼠阴道及宫颈炎动物模型的复制[2]
　　取 50 只大鼠，雌性，160-200g，用带有灌胃针头的1ml 的注射器在每只大鼠阴道内约1cm 处按0.2ml／只注射苯酚胶浆，每天1 次，连续4 天，观察并记录外阴的变化。造模4天后，大鼠阴道口会出现白色甚至是脓性分泌物，阴道口红肿，溃烂，阴道充血。这表明造模成功。
　　1.1.3 给药治疗
　　造模成功的次日，将造模成功的50 只雌性大鼠，随机分为5 组，每组10 只，分别作为：①中药复方栓基质对照组（空白对照组）：泡腾栓基质450mg/kg；②～④中药复方栓栓高、中、低三种剂量组：223.25、111.63、55.82mg 生药/kg(450、225、112.5mg 栓重/kg，分别为临床成年人每日拟用平均剂量的10 倍、5 倍、2.5 倍)；⑤消糜阴道泡腾片(阳性对照药物)400mg/kg(为临床成年人每日剂量的10 倍)。造模4 天(4 次)后治疗10 天。给药方法：将受试药物中药复方泡腾栓、栓剂基质(空白对照物)或消糜阴道泡腾片(阳性对照药物)于给药前用小刀将栓剂切成细条状，根据大鼠体重的所需用栓剂重量，称量出适合重量的细条状栓剂，略捏成圆柱状，塞入大鼠阴道内给药治疗。
　　1.1.4 在末次给药次日处死大鼠，取阴道至子宫分角处组织的一半(称重,最后计算每克标本中的含量)，剪碎，置入生理盐水5mL 内浸泡2 小时，1500r/min 离心10 分钟。取上清液1mL，加入0.5mol/L KOH-甲醇溶液2ml，置于50℃水浴箱内异构化20 分钟，取出后，立即冷却，取1mL 加入甲醇2ml。于波长278nm 处测定OD 值，用OD 值代表PGE2 的含量。
　　1.1.5 另外取10 只正常的大鼠，采用上面同样的处理方式进行阴道、子宫分角处组织中PGE2含量测定。
　　1.1.6 统计学方法
　　数据用x±s 表示，采用spss15.0 统计软件进行处理，组之间的比较用Dunnett t 检验。
　　1.2 试验结果
　　试验结果见从和图中可以看出，中药复方栓剂基质对照组(即模型组)与正常对照组相比，模型组阴道，宫颈组织中PGE2 含量远远高于正常对照组，有显著性差异(P<0.05)，提示模型对照组处于炎症反应时期，说明造模的成功。与模型对照组相比，消糜阴道泡腾片，中药复方栓剂高剂量组，中剂量组，低剂量组阴道宫颈组织中的PGE2 的含量均有显著性的不同程度的减少(P 均<0.05)，并且中药复方栓剂高剂量组与低剂量组对PGE2 含量的影响相对来说比较接近，而中剂量组的影响相对来说就要弱一点。说明阳性药物消糜阴道泡腾片与此中药复方栓剂均可以降低苯酚胶浆复制的大鼠阴道炎模型阴道组织中PGE2 含量。
　　
　　2 结论
　　
　　本文用 25%的苯酚胶浆复制大鼠阴道炎模型，测量了阴道组织中PGE2 的含量，发现此中药复方栓剂能够降低苯酚胶浆复制大鼠阴道炎模型阴道组织中PGE2 的含量，提示此中药复方栓剂泡腾栓抑制炎症反应的作用与减少炎症组织中PGE2 的含量有关。
　　
　　3 讨论
　　
　　炎症的发生过程中会产生一系列的炎症介质，炎症介质是一组参与炎症反应并具有致炎作用的体液性因素，各种炎症介质之间相互作用，由此可以产生一系列的连锁反应。花生四烯酸正常存在于细胞膜磷脂内，在炎症刺激下细胞的磷脂酶被激活，使膜磷脂释放出花生四烯酸。花生四烯酸经环氧化酶代谢产生前列腺素[3]。前列腺素作为一类重要的炎性介质，在炎症的全过程中都存在PGs 的合成与释放，前列腺素E2(PGE2) 不仅能增强组胺和缓激肽的作用，提高血管通透性，而且还有很强的扩张血管，导致渗出性炎症，还有致热，致痛的作用[25]。通过药效学实验发现中药复方栓具有抗炎，镇痛的作用，因此通过对实验大鼠的阴道组织中PGE2 含量进行了测定，来探求此复方栓剂抗炎作用的机理。结果发现此中药复方能够减少阴道宫颈组织中PGE2 含量，说明中药复方栓抗炎，镇痛的机理降低前列腺素E2的含量有关。

　　
　　[参考文献] (References)
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　　[3] 崔晓燕,王素霞,候永利.金银花提取物的抗炎机理研究[J].中国药房, 2007,18(24):1861-1863
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　　[8] 王文魁,沈映君,齐云,聂红.辛夷抗炎作用的实验研究[J].成都中医药大学学报,2000,23(1):58-61