葛根素总黄酮滴丸剂的制备与质量控制

作者：孙海慧，郝吉福，郭丰广 作者单位：1.泰山医学院附属泰安医院心血管内科，山东 泰安 271000; 2.泰山医学院药学院，山东 泰安 271016

　　【摘要】 目的 制备葛根素总黄酮滴丸剂，并确定其质量控制方法。方法 从基质、提取物与基质的用量配比等方面进行考察筛选滴丸剂制备工艺，并用TLC法测定滴丸中葛根素含量。结果 以PEG4000为基质，贮液罐温度90 ℃，滴速50 滴/min， 冷凝剂液体石蜡温度为15 ℃，滴头内外径为1.9 mm/2.5 mm，葛根素总黄酮与基质比例为1∶8时进行滴制，滴丸成型率较高，载药量最大。结论 本品制备工艺可行,质控方法可靠。

　　【关键词】 葛根素;滴丸剂;制备

　　Preparation and quality control of puerarin total flavonoids dropping pillsSUN Haihui1，HAO Jifu2, GUO Fengguang2

　　(1. Central Hospital Of Taian, Taian 271000 China; 2. School of Pharmacy, Taishan Medical University, Taian 271000 China)

　　Abstract:Objective: To prepare dropping pills and control its quality. Methods: The preparation techniques were studied based on the the proper proportion among matrix, puerarin and total flavonoids in the dropping pills, and the puerain content in the dropping pills was determined by TLC. Results: The matrix was PEG4000. The ratio of matrix and total flavonoids was 1∶8, and the mixture storage temperature was kept at 90 ℃. Liquid paraffin was refrigerant. Internal and external diameters of burette were equal to 1. 9mm and 2.5mm. Drug was dripped into the refrigerant at 15 ℃ with 50 drops per minute. Moulding probability was high. Conclusion: The procedure for the preparation is feasible and method for quality control is reliable.

　　Key words:puerarin; dropping pill; preparation

　　葛根具有解肌退热、生津、透疹、升阳等功效，在葛根的有效成分中，以葛根素的研究受到关注，它具有明显的心血管药理作用，在防治冠心病、心肌梗死等心血管疾病方面是较有发展前途的药物，但其溶解度低，口服生物利用度小限制了临床广泛应用，本试验以葛根素为研究对象，采用固体分散技术制备成滴丸剂，以期发挥滴丸剂高效、速效的特点，为葛根这一传统中药进行现代化制剂研究提供参考依据。

　　1 仪器与试药

　　DWJ2000S滴丸机(烟台康达尔药业); FA1004型分析天平(上海精科天平);薄层扫描仪CD60(德国Desaga);ZBS6G智能崩解试验仪(天津大学无线电厂)。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号: 75229002)。葛根素黄酮,自提,葛根素含量74.52%;PEG4000(天津市科密欧化学试剂开发中心,分析纯);液体石蜡(莱阳市双双化工有限公司,分析纯);其它所用试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 葛根素滴丸的制备

　　参考文献[1,2]及预试验结果，分别选择基质种类、药物与基质的混合比例、滴制温度和滴速为考察因素，以滴丸成型率、丸重差异为评价指标，采用L9 ( 34) 表设计正交试验，试验设计及结果分别见表1、表2 、表3。表1 正交试验因素水平表根据正交试验安排，采用热熔法将基质熔融后与不同比例药物混合均匀，设定滴丸机工作参数，以液体石蜡作为冷凝剂进行实验，实验安排及结果见表2。表2 L9( 34) 正交试验结果表3 方差分析表

　　综合表2、表3的结果可看出,影响葛根素总黄酮滴丸成型率的因素从大到小依次为B > D > C > A ,数据经方差分析处理后, B因素对滴丸剂的成型率有极显著性影响,C、D因素有显著性影响。在保证滴丸剂成型性前提下，从滴丸剂载药量方面来考虑，药物与基质的混合比例越小越好，并且在B因素中两个水平差别不大，因此得出最佳滴制条件为：选择PEG4000做为基质、药物与基质之间的比例为1∶8、滴头温度90 ℃、滴速50 d·min1。

　　根据本试验确定的成型工艺, 连续制备3 批葛根素总黄酮滴丸,(批号20070512，20070513，20070514)，试验结果表明所制得滴丸成型率高，载药量最大，所制得的滴丸剂见图1。

　　图1 自制葛根素总黄酮滴丸的外形图

　　2.2 质量检查[3]

　　参照《中国药典》2005版附录ⅠK项下要求，取供试品滴丸(批号20070512，20070513，20070514)进行外观、重量差异、溶散时限检查，所制得的滴丸剂圆整均匀，呈棕褐色，色泽一致，无粘连现象，表面无液体石蜡黏附;平均每粒丸重为0.03 g，重量差异结果符合规定;溶散时限结果符合规定。

　　2.3 含量测定

　　2.3.1 标准曲线制备

　　精密称取葛根素标准品0.0046 g，用甲醇溶解后转移至5 ml 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配制成浓度为0.92 mg·ml1的对照品溶液。精密吸取对照品溶液2 μl点于硅胶G板上，照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录ⅥB)实验，以氯仿—甲醇—水(7.5∶2.5∶0.25，v/v)为展开剂，上行展开，展距为8 cm，取出晾干后在200—400 nm范围内进行全波长扫描，结果如图2所示，结果表明葛根素在255 nm处呈最大吸收。故选定葛根素的薄层色谱斑点扫描波长λ=255 nm，狭缝0.04 mm×10.00 mm，分辨率0.10 mm，反射式锯齿扫描法。精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10 μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以峰面积积分值对浓度绘制标准曲线，计算得回归方程：A=378.88C +892.09, r=0.9967

　　2.3.2 供试品溶液的制备

　　取自制滴丸(批号20070513)40粒，精密称重，加水溶解后用水饱和正丁醇萃取3次，每次20 ml,分离正丁醇层，置蒸发皿中蒸干，残渣用适量甲醇溶解，将上清液用甲醇定容至10 ml容量瓶中，制成供试品溶液。

　　2.3.3 重复性和稳定性试验

　　取批号为20070513的样品5份，按2.31标准曲线制备项下操作测定，结果葛根素含量的RSD为2.6%，表明方法重复性好。精密吸取葛根素对照品溶液2 μl点于硅胶板上，按2.3.1标准曲线制备项下操作，测定斑点峰面积积分值，间隔20 min测定斑点峰面积积分值，结果葛根素峰面积基本不变，其RSD=3.2%(n=6)表明葛根素斑点面积在120 min内稳定。

　　图2 薄层扫描波长选择

　　2.3.4 精密度试验

　　精密吸取对照品溶液2μl点于同一硅胶板上，按2.3.1标准曲线制备项下操作，测定斑点峰面积积分值，葛根素RSD=0.91%(n=6)，表明方法精密度良好。

　　2.3.5 加样回收率试验

　　精密称取已知含量的滴丸3份，分别置具塞锥形瓶中，精密加入供试品含量的80%、100%、120%葛根素对照品溶液，按2.3.2项下操作，制成加样回收供试液，按含量测定项下操作，结果见表4。表4 加样回收试验结果

　　3.3.6 样品中葛根素含量测定

　　取3个批号的葛根素总黄酮滴丸，按含量测定项下方法测定样品中葛根素含量，图谱见图3，含量测定结果见表5。

　　图3 葛根素薄层扫描图谱

　　(编号1—5为葛根素对照品，编号6—13为供试品溶液点)表5 滴丸剂中葛根素含量测定结果

　　3 讨 论

　　3.1 滴丸是由药物与基质加热熔化后，滴入不相混溶的冷却液中，冷凝后收缩成丸的一种剂型[4]。为发挥葛根素总黄酮的速效作用，克服其溶解度低的特点，在选择基质时首先考虑水溶性基质，而常用的此类基质为聚乙二醇类，因此考虑选择成型性较好的聚乙二醇(PEG)做为基质进行考察。

　　3.2 使用薄层扫描法测定滴丸含量的关键是样品溶液的制备，实验中曾尝试采用不同的方法制备滴丸样品溶液，例如：①直接用甲醇将滴丸溶解并定容至一定体积容量瓶中;②用乙酸乙酯溶解滴丸并定容至一定体积容量瓶中;③用甲醇将滴丸溶解并定容后，置冰水(0℃)中冷冻析出PEG4000，取上清液为样品溶液等。但PEG400在甲醇和乙酸乙酯中均存在一定程度的溶解，而展开剂中又含有一定量的水分，使得点样展开后斑点均较分散，无法满足薄层扫描的要求。最后经实验采用加水溶解，正丁醇萃取的方法制备供试品溶液可避免PEG4000的干扰。

　　【参考文献】

　　[1] 闫荟,赵汉臣,靳英华,等.血塞通滴丸成型工艺的研究[J].中国药房,2005,16 (17):12991300.

　　[2] 朱如彩,谢昭明,李顺祥.舒心滴丸成型工艺研究[J].中成药,2002,24(4):249251.

　　[3] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[S].2005年版.北京:化学工业出版社,2005 .附录10.

　　[4] 张兆旺. 中药药剂学[M].第2版.北京: 中国中医药出版社,2007:331.