非小细胞肺癌中血管内皮生长因子的检测及意义

　　【摘要】 目的：检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血管内皮生长因子(VEGF)水平,以探讨二者之间的关系。方法：酶联免疫吸附法(ELISA)检测80例NSCLC患者和30例健康献血者VEGF含量。结果：NSCLC患者VEGF平均含量为(887.3±130.7 )pg/mL,明显高于对照组(250.2±47.5 )pg/mL(P<0.01)，其水平与性别、年龄、组织学类型、分化程度、原发肿瘤大小无关，而与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.01)。结论：VEGF可作为NSCLC早期诊断和预后评价的一个可靠参考指标。

　　【关键词】 血管内皮生长因子; 非小细胞肺癌

　　Detection and Clinical Significance of Vascular Endothelial Growth Factor in Non-small Cell Lung Carcinoma

　　WU Jian-guo,HONG Qiong-chuan,ZHAO Yong,WANG Li-xu,MA Cheng-fang,WEI Chun-yong

　　(Department of Cardiothoracic Surgery;Department of Pathology,Longgang Central Hospital,Shenzhen,Guangdong 518116,China)

　　Abstract:Objective To detect the level of serum vascular endothelial growth factor (VEGF) in patients with non-small cell lung cancer(NSCLC),and to explore its clinical significance.Methods The content of VEGF was measured by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) in 80 patients with NSCLC and 30 healthy controls.Results The average content of VEGF in patients with NSCLC was 887.3±130.7 pg/mL and significantly higer than that of control group(250.2±47.5 pg/mL)(P<0.01).The level of VEGF had no significant correlation with gender,age,histological type,degree of differentiation,size of tumor,but it was significantly correlated with clinical stage and lymphatic metastasis(P<0.01).Conclusion VEGF could be a reliable index for early diagnosis and prognostic evaluation of NSCLC.

　　Key words:Vascular endothelial growth factor;Non-small cell lung cancer

　　肿瘤血管增生影响肿瘤的发生和发展,如何抑制其生长成为肿瘤治疗新靶点[1]。有研究发现血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)在促进肿瘤血管生成过程中有重要作用[2]，其在癌组织中表达水平显著高于癌旁组织和良性组织,且与肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期等均有密切关系[3]。为探讨肺癌中最常见的类型非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)与血管内皮生长因子的关系，本研究检测了NSCLC患者血液中VEGF水平, 以评价其与NSCLC临床特征之间的关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 一般资料

　　80例NSCLC初治患者,男47例,女33例;年龄36～73岁,平均61.02岁。均经病理组织学确诊,其中鳞癌38例,腺癌42例;TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期22例,Ⅲa期16例,Ⅲb期29例, Ⅳ期13例。另选30例健康献血者作为正常对照组。

　　1.2 ELISA检测VEGF水平

　　所有检验者抽取空腹外周血3 mL,离心分离血清,除空白孔外,分别将标本和不同浓度标准品(100 μL/孔)加入相应孔中,37 ℃孵箱孵育90 min，缓冲液洗4次;加入生物素化抗体100 μL/孔,37 ℃孵育60 min;再加入酶结合物工作液孵育30 min;加入底物显色剂,37 ℃避光孵育15～20 min后加终止液(100 μL/孔),混匀，即刻测量OD450值。以标准品曲线作对照,计算各标本浓度。

　　1.3 数据统计

　　采用SPSS 11.5软件包进行统计分析,数据用均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用t检验,多组比较用单因素方差分析和Students-Newman-Keuls法。P<0.05有显著性差异。

　　2 结果

　　表1 SVEGF含量与临床病理特征(略)

　　表2 不同临床分期组间的比较(略)

　　注:“+”表示P<0.05;“-”表示P>0.05

　　NSCLC患者血清VEGF表达水平为(887.3±130.7) pg/mL,明显高于对照组(250.2±47.5) pg/mL(P<0.01)。VEGF含量与性别、年龄、组织学类型、分化程度、原发肿瘤大小无关(P>0.05) 。但不同临床分期、淋巴结转移(N分期)及远处转移组之间则存在显著性差异(P<0.01),即随着临床分期、淋巴结转移的进展,VEGF含量呈明显升高趋势(表1-3)。

　　表3 不同淋巴结转移组间的比较(略)

　　注:“+”表示P<0.05;“-”表示P>0.05

　　3 讨论

　　血管内皮生长因子(VEGF)又称血管通透因子,是一种特异性促血管内皮细胞增殖的有丝分裂原,是由多种亚型组成的多家族蛋白质,是已知最强的血管通透剂。其主要功能是:⑴增加微血管通透性,以旁分泌方式作用于血管内皮细胞,使内皮细胞内囊泡VVO增加,形成有利于大分子渗透的通道,促进血管外纤维蛋白凝胶形成,以提供内皮细胞和肿瘤细胞生长的基质;⑵改变内皮细胞基因的活化形式,上调尿激酶型纤溶酶原激活物u-PA和组织型纤溶酶原激活物t-PA以及纤溶酶原激活物抑制因子PAI-1的表达,诱导内皮细胞表达蛋白水解酶、间质胶原酶和组织因子,促使细胞外基质降解,增加血管通透性;⑶促使血管内皮细胞分裂增殖、迁移; ⑷抑制宿主抗原递呈细胞成熟,具有免疫抑制或免疫逃避作用。

　　大量研究认为肿瘤的生长和转移依赖于新生血管形成,NSCLC也不例外。Hanahan等[4]于1996年提出了血管生成可开关平衡假说,认为血管生成由血管生成促进因子和血管生成抑制因子共同调控，而血管生成促进因子中VEGF作用最强。新生血管是指在某些因素的刺激作用下由内皮细胞分化而成的一些新血管,其对于实体瘤的生长、发展非常重要,是影响肿瘤生物学行为和转移复发的重要因素。

　　新生的肿瘤血管不仅是癌细胞增殖的内部条件,也是癌细胞浸润和血行转移的第一路径[5] 。肿瘤在生长过程中需要新生血管不断生成才能满足其扩增和营养代谢的需要,当肿瘤形成自身的血管系统后,就可以迅速生长,同时瘤细胞进入血管或淋巴管发生系统转移。NSCLC作为一种实体肿瘤, 肿瘤新生血管形成是肿瘤生长、侵袭和转移的重要条件。肿瘤血管输送营养物质, 但又自然成为携带癌细胞离开原发瘤灶形成转移瘤的工具和通道。因此肿瘤血管生成是当今备受重视的肿瘤研究热点之一[6]。

　　本研究结果显示,NSCLC患者VEGF含量显著高于正常对照组(P<0.01)，与文献报道一致[7]，表明VEGF与NSCLC的发生有重要关系。比较不同临床病理特征的NSCLC患者VEGF表达,发现不同的性别、年龄、组织学类型、分化程度、原发肿瘤大小、其VEGF含量无显著性差异,但VEGF含量与临床分期、淋巴结转移(N分期)及远处转移密切相关,且随着淋巴结转移范围的扩大和临床分期的进展，含量亦呈逐渐上升趋势,提示血清VEGF在肺癌淋巴结转移、病理分期和疾病进展过程中起重要作用，非小细胞肺癌患者血清VEGF含量测定可作为评价非小细胞肺癌患者有无转移、疾病分期及预后评估的一个参考指标。

　　【参考文献】

　　1] Schneider BP,Sledge GW.Drug insight:VEGF as a therapeutic target for breast cancer[J].Nat Clin Pract Oncol,2007,4(3):181-189.

　　[2]Tang Y,ZhangD,Fallavollita L,et al.Vascular endothelial growth factor expression and lymph node metastasis are regulated by the type I insulin-like growth factor receptor[J].Cancer Res,2003,63(6):1 166-1 171.

　　[3] 车卫国,周清华,张尚福,等.检测肺癌中的微血管密度及其临床意义[J].中国肺癌杂志,2000,3(4):284-288.

　　[4] Hanahan D,Folkman J.Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis[J].Cell,1996,86(3):353-364.

　　[5] 楚广民,付秀虹,陈小兵,等.VEGF、nm23表达及树突状细胞浸润与肺癌预后的相关性[J].中国误诊学杂志,2003,3(4):493- 495.

　　[6] 孙 慧,战忠利,吴 洁,等.人乳腺癌和癌旁组织中血管内皮生长因子与微血管密度的表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志,2002,19(1):29-30.

　　[7] Trapé J,Buxó J,de Olaguer JP.Serum concentrations of vascular endothelial growth factor in advanced non-small cell lung cancer[J].Clin Chem,2003,49(3):523-525.