新疆维吾尔族妇女宫颈癌与人乳头状瘤病毒多重感染的关系研究

　　【关键词】 新疆 维吾尔族妇女 宫颈癌 人乳头状瘤病毒 多重感染

　　The study of the relationships between HPV multiple infection and

　　cervical cancer of Uygur Women in Xinjiang

　　ZHANG SuQin, Kurbansha·Yakup, Guzalnur·Abliz, et al

　　(Department of Gynecology,Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University,

　　Urumqi 830011, China)

　　Abstract: Objective: To study the relationships between HPV multiple infection and cervical cancer in Xinjiang Uygur Women. Method: To detect 21 subtypes of HPV from 350 cervical cancer cases and 100 normal tissues, by using flowthrough hybridization and gene chip (HybriMax) method. Results: The positive rate of HPV in cervical cancer and control group were 83.14% (include simple and multiple infection) and 7.0% respectively; Among cervical cancer there are 255 cases of simple infection with the rate of 72.86%(255/350), and it occupies 87.63%(255/291) of HPV positive cancer. There were 36 cases of multiple infection ,it occupies the 10.29%(36/350) of cervical cancer patients and 12.37%(36/291) of HPV positive cancer patients. Two types combined infection was common it occupies 91.67%(33/35) of multiple infection; The HPV16 combined infection with other types were common and it occupies 97.22%(35/36) of multiple infection. The positive rate of HPV in control group was 7.0%(7/100), among them there 6 cases of simple infection (6.0%) and one case of multiple infection (1.0%). The positive rate of multiple infection of cervical cancer group were significantly higher than that in control group (P<0.01). The positive rate of multiple infection in different clinical stages and pathological types has no statistical differences (P>0.05). Conclusions： The HPV16 were common in multiple infection, two types combined infection were common; HPV16 combined infection with other types were common in multiple infection. But the rate of multiple infection were low and the multiple infection shows its simplarity, These may be associated with the geografic surroudings, life style, less moveability, hereditary charactaristic of Uygur patients and its conservative in marriage with other nations and maintain its hereditary charactaristics.

　　Key words: cervical cancer; Uygur; human papillomavirus; multiple infection; hybriMax method

　　目前宫颈癌被认为是惟一有希望消灭的癌症，因为它的病因已明确为高危型人类乳头状瘤病毒(Human papilloma virus ，HPV )感染，高危型HPV的持续感染是宫颈癌及其癌前期病变发生及发展的必要条件。很多报道显示95%以上的宫颈癌组织中含有HPV DNA，其中以HPV16感染为主，其次为HPV18、45、52、58等[1-3]。由于HPV检测方法的局限性，有关HPV的多重感染是否增加宫颈病变发生的危险性方面的研究较少。有关维吾尔族宫颈癌与HPV关系的研究也仅限于与HPV16感染的关系研究。本研究旨在对新疆维吾尔族宫颈癌患者及正常人群中的HPV多重感染的分布进行系统性研究。

　　1材料与方法

　　1.1一般资料选择2004年1月～2006年7月，新疆医科大学附属肿瘤医院、和田地区各县医院、喀什地区第一人民医院、喀什地区第二医院、喀什地区妇幼保健医院门诊就诊及住院患者的经病理证实的维吾尔族宫颈癌新鲜标本350例，宫颈癌临床分期及病理组织学分级参照2003年FIGO的宫颈癌诊治规范标准。病理类型：宫颈鳞癌333例，宫颈腺癌12例，其他类型5例。临床分期：Ⅰ期43例，Ⅱ期197例，Ⅲ期97例，Ⅳ期13例。患者平均年龄48.5岁(21～76岁)。对照组标本包括良性病变切除子宫的非癌宫颈标本(80例，宫颈外观基本正常)和喀什及和田现场调查的宫颈标本(20例，细胞学证实炎症或无异常，并且宫颈外观基本正常，既无糜烂及肥大等情况),共计100例，平均年龄44.3 岁(21～66岁)。所有新鲜标本均于放疗或化疗之前采集，立即入液氮后，再置于-86℃冰箱内保存。

　　1.2方法

　　1.2.1DNA的提取采用文献[3]酚/氯仿方法。

　　1.2.2HPV分型检测方法采用凯普HPV基因扩增分型检测试剂盒(批号060501)。本试剂盒是以凯普医用核酸分子快速杂交仪为平台，利用导流杂交的原理，在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上，可一次性快速检测占中国人群HPV感染95%的21种HPV亚型的基因分型及多重感染。此21种亚型包括13种高危亚型 (HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)、5种低危亚型(HPV6、11、42、43、44)和3种中国人群常见亚型(HPV53、66和CP8304型)，严格按说明书操作。

　　1.2.3结果判定根据说明书提供的参照判定阳性及阴性。

　　1.3统计学处理采用SPSS13.0软件进行统计处理，用χ2检验进行统计分析，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1HPV多重感染及单一感染在宫颈癌及对照组中的表达350例宫颈癌组织中HPV阳性者291例(包括单一感染及多重感染)，阳性率为83.14%。其中HPV单一感染者255例，占宫颈癌患者的72.86(255/350)，占HPV阳性宫颈癌的87.63%(255/291);而多重感染者36例，占宫颈癌患者的10.29%(36/350)，占HPV阳性宫颈癌的12.37%(36/291)。HPV的多重感染中以二重感染为主，占多重感染的91.67%(33/36)，三重感染只占8.33%(3/36),四重感染及其以上者无1例。对照组中HPV阳性率为7.00%(7/100)，其中单一感染者6例(6.00%),二重感染者1例(1.00%)。宫颈癌组HPV多重感染率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。

　　2.2HPV 多重感染分布情况350例宫颈癌组织中多重感染者36例，占HPV阳性宫颈癌患者的12.37%(36/291)。宫颈癌中多重感染基本上以HPV16与其他型别合并感染为主，占多重感染的97.22%(35/36)，与HPV16多重感染的其他类型依次为:HPV18为27.78%(10/36)，HPV68为16.67%(6/36)，HPV39为13.89%(5/36)，HPV58为11.11%(4/36);多重感染的其他类型只有HPV58;68为1例。而在对照组中多重感染只有1例，即HPV58;43，HPV58高危型及HPV43低危型，占对照组阳性病例的14.28%(1/7)，结果见表1和图1～3。表1HPV 各亚型在HPV多重感染中的分布HPV亚型宫颈癌例数与HPV阳性之比

　　2.3HPV多重感染与宫颈癌病理类型及分期的关系HPV多重感染在各病理类型宫颈癌中的分布比例差异无显著性(P>0.05)。HPV的多重感染在Ⅰ～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期中的分布比例差异也无统计学意义(P>0.05)(表2)。

　　3讨论

　　Schellekens等[4]报道宫颈癌中HPV的多重感染率为14.0%，而Huang等[5]研究提示宫颈癌中HPV的多重感染率为28.9%，陶萍萍等[6]等报道表2HPV多重感染与宫颈癌的病理类型及分期的关系[例 (%)]项目 HPV多重感染病理类型鳞癌(n=333)33( 9.91)腺癌(n=12)1 (8.33)其他(n=5)2 (40.00)临床期别Ⅰ～Ⅱ期(n=240)24(10.00)Ⅲ～Ⅳ期(n=110)12(10.91)宫颈癌中HPV的多重感染率为48.1%。本研究中350例宫颈癌组织中HPV阳性率(包括单一感染及多重感染)为83.14%。其中HPV单一感染占宫颈癌患者的72.86%，占HPV阳性宫颈癌的87.63%;多重感染者36例，占宫颈癌患者的10.29%(36/350)，占HPV阳性宫颈癌的12.37%(36/291)，HPV多重感染率低于文献[4-11]报道，而接近Milutin等[7]报道。本文多重感染率低，对照组中HPV感染率及多重感染率均低于文献报道，可能与本民族移动较少,与其他民族同婚极少及生活习惯等因素有关。有文献报道在门诊就诊和正常人群中HPV的多重感染率在总的HPV感染中占的比例相当高,甚至达到49.7%[8] ，多重感染多见于性生活活跃的年轻妇女和高危人群，因此认为在多重感染中性行为起一定的作用[9]。多重感染基本上以二重感染为主，陶萍萍等[6]报道在宫颈癌中HPV感染单一感染率为51.9%，多重感染率为48.1%，其中二重感染为33.3%，三重感染率及四重感染率均为7.4%，本研究结果显示多重感染率低、但二重感染率在多重感染中占的比例较大,为91.67%，高于其他报道。宫颈癌中多重感染基本上以HPV16与其他型别合并感染为主，文献报道HPV16和HPV18合并感染在多重感染中占多数,约为30.0%[5] ，本文HPV16与其他型别合并感染占多重感染的97.22%(35/36)，其中HPV16与HPV18合并感染较多见，占27.78%,接近文献报道。也有报道显示二重感染者HPV16和HPV52在多重感染中最多见[2]。本文HPV16;68 占多重感染的17.14%，与文献报道有差异[7-8]。本研究中宫颈鳞癌、腺癌及其他类型中多重感染的阳性率分别为9.91%、8.33%及 40.00%，虽然其他类型(包括鳞腺癌)中比例高,但差异无统计学意义。Lee等[12]认为多重感染发生宫颈癌的危险性比单一型别感染者高, 陶萍萍等[6]采用凯普导流杂交HPV DNA检测法检测各种宫颈病变中HPV的多重感染率为44.6%,而单一感染率为55.4%，而在宫颈癌中为48.1%，提示随着病变的不断升级，多重感染率逐渐增加，本研究发现291例HPV阳性的患者中36例患者及1例对照组的妇女出现HPV的多重感染，在Ⅰ～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期中HPV的多重感染分别为10.00%及10.91%，两者在统计学上无显著差异。而在对照组中多重感染只有1例，占对照组阳性病例的14.28%(1/7)，即HPV58;43，HPV58高危型及HPV43低危型。综上，新疆维吾尔族妇女宫颈癌多重感染中以二重感染为主，多重感染的类型以HPV16为主即HPV16与其他类型合并感染，但多重感染的比例低于文献报道、其类型较单一，这可能与此民族基本居住在新疆，移动较少、与其他民族同婚极少、遗传背景、生活习惯及居住环境等因素有关。

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