光纤传感原位分析布美他尼注射液

　　【摘要】 目的：研究一种光纤传感原位快速分析注射剂的方法，快速定性、定量布美他尼注射液。方法：采用光纤传感原位技术对布美他尼注射液进行紫外吸收光谱鉴定和含量测定。探测端直接浸入注射剂原溶液，输入样品相关信息，计算机可显示光谱，并给出药物含量，同时采用药典含量测定方法进行对照。结果：光纤传感原位分析法可瞬间获得注射剂的特征图谱，提取相关参数;含量测定结果与药典方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：光纤传感原位分析法可用于布美他尼注射液的快速分析。

　　【关键词】 光纤传感; 原位分析; 布美他尼; 快速鉴别; 注射剂

　　In-situ analysis of Bumetanide injection by optic fiber sensor

　　LI Ying， LI Li， ZHANG Qi-zhou, et al

　　(Department of Pharmaceutical Analysis， Xinjiang Medical University ， Urumqi 830011， China)

　　Abstract: Objective： To study a method which can in-situ analyse injection by optic fiber sensor rapidly，and determine Bumetanide injection spectrum and content. Methods： Adopting fiber-optical sensing in-situ test technology to determine the ultraviolet absorption spectrum and content of Bumetanide injection, the detector end was dipped into the original solution of the injection directly, when information related to the samples was imported into the computer, it can show the scanning map and provide drug content. The consistency of this method with the method in Ch.P (2005) in regard to determination was studid at the same time. Results: The method can be instantaneous access to the feature map of the injection and obtain the related parameters. The determination results obtained by this method had no significant difference compared with the method in Ch.P 2005 (P>0.05). Conclusion: The method of in-situ analysis by optic fiber sensor can be used for rapid analysis for Bumetanide injection.

　　Key words: optic fiber sensor; in-situ analysis; Bumetanide; rapid identification; injection

　　药物鉴别可选用的方法有化学法、理化常数测定法、仪器分析法和生物检定法等等，其中仪器分析法又可分为色谱法和光谱法，光谱鉴定是药物定性鉴别的重要方法之一。测定药物中有效成分的含量是保证药品疗效的重要手段，目前常用的含量测定方法有重量分析法、容量分析法、分光光度法和色谱法等[1]，但这些方法均难以实现现场快速对药品进行定性和定量。光纤传感分析法是集光纤探头、信号传输光导纤维、CCD检测和计算机软件数据处理一体化的自动检测方法，快速采集样品的图谱，通过软件系统提取相应参数，根据数据库中收载的对照品信息，对样品进行判断分析，同时可计算样品含量[2]。光纤传感原位分析法对于药品现场监测、基层药品现场抽查及保障人民群众用药安全方面有重要意义。

　　布美他尼注射液是利尿药，为《中国药典》收载的品种，临床应用较为广泛。其鉴别方法有荧光法、沉淀法和呈色法;定量用紫外法[3]。本研究采用光纤传感原位技术对布美他尼注射液进行紫外吸收光谱鉴别和含量测定，并与2005年版《中国药典》含量测定方法进行对照，现报道如下。

　　1 仪器与试剂

　　紫外分光光度计(GBC cintro-40 澳大利亚GBC科学仪器公司)，FODT-101型光纤药物溶出度实时测定仪(Fiber-optic dissolution test system, FODT, 新疆医科大学-新疆富科思生物技术公司联合研制)。磷酸二氢钾(AR，天津市福晨化学试剂厂)，氢氧化钠(AR，天津北方化玻购销中心)，去离子重蒸水(新制)。布美他尼注射液(桂林南药股份有限公司，规格：2 ml∶0.5 mg ，批号：050101)，布美他尼对照品(中国药品生物制品检定所,批号：173-9301)。磷酸盐缓冲液(pH=7.4)是按照《中国药典》附录中规定的方法配制的，即取磷酸二氢钾1.36 g， 加0.1 mol/L氢氧化钠溶液79 ml，用水稀释至200 ml，用氢氧化钠和磷酸调pH值至7.4即得。

　　2 方法与结果

　　2.1 图谱鉴别

　　2.1.1 对照品溶液图谱测定 贮备液制备: 精密称取布美他尼对照品25.0 mg置50 ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液稀释至刻度，溶液浓度为0.5 mg/ml;精密量取贮备液1.0 ml，置10 ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，溶液浓度为0.05 mg/ml。在紫外分光光度计上进行测定，得到紫外吸收光谱图(图1)。精密量取贮备液5.0 ml，置10 ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，溶液浓度为0.25 mg/ml。选择规格为1 mm的探头，在FODT上进行测定，得到紫外吸收光谱图(图2)，按照软件要求输入布美他尼对照品信息,并记录保存。

　　2种方法测定的λmax分别为329.0 nm和328.5 nm，二者是一致的。但在FODT上测定溶液的浓度为0.25 mg/ml，恰好是布美他尼注射液原溶液的标示浓度。在紫外分光光度计上测定样品时需将原溶液稀释5倍，但在FODT上可直接对原溶液进行测定。

　　2.1.2 样品图谱测定 精密量取布美他尼注射液原溶液2.0 ml，置10 ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，溶液浓度约为0.05 mg/ml，在紫外分光光度计上进行测定，得到紫外吸收光谱图(图3)。在FODT上选用规格为1 mm的探头直接插入布美他尼注射液原溶液(溶液浓度约为0.25 mg/ml)进行测定，得到紫外吸收光谱图(图4)。

　　2种方法测定的λmax分别为327.7 nm和327.5 nm，二者是一致的。通过改变探头规格，在FODT上可直接测定原溶液。在FODT上测定样品时，输入样品信息，软件系统可以根据样品信息直接调出对照品的图谱信息，并根据样品测定的图谱，对λmax及相对应的E值等相关参数进行比对，从而对样品进行快速定性、定量。

　　因FODT上氘灯在波长<230 nm处能量衰减较大，在图谱上可以看到波长<230 nm处吸收度有下降的趋势，但不影响测定结果。出现以上问题是由于光纤材料造成的，今后需对光学系统进行研究，通过光学补偿来解决此问题。

　　2.2 快速定量和方法学考察

　　2.2.1 《中国药典》规定的测定方法 精密量取布美他尼注射液原溶液5.0 ml，置25 ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，在紫外分光光度计上进行测定，在328 nm波长处测定吸收度，A=0.495 8，按C17H20N2O5S的吸收系数(E1%1 cm)为98.5进行计算，得到溶液浓度为0.251 7 mg/ml，相当于2 ml原溶液中含有布美他尼0.503 mg。

　　2.2.2 FODT测定标准曲线 分别精密量取贮备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，置10 ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，制备系列浓度溶液0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mg/ml。使用1 mm规格的探头，于FODT上在328 nm波长处测吸收度为0.098、0.194、0.292、0.393、0.487、0.589，考察线性关系。回归方程：Y=0.509X+0.001(r=0.999，n=6)。

　　2.2.3 FODT测定日内日间精密度 分别精密量取贮备液5.0、3.0、1.0 ml各3份，置10 ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，配制成高、中、低浓度溶液共9份(浓度分别为0.05、0.15、0.25 mg/ml)于FODT上测定。日内精密度RSD=0.97%(n=6)，日间精密度RSD=0.87%(n=6)。

　　2.2.4 回收率试验 精密量取布美他尼注射液20 ml，加磷酸盐缓冲液稀释至100 ml所得的溶液12份各5 ml，分成4组，各组分别精密加对照品贮备液0.0、1.0、2.0、3.0 ml，加磷酸盐缓冲液(pH=7.4)至10.0 ml，制成本底溶液及浓度分别约为0.075、0.125、0.175 mg/ml的4组溶液，将上述溶液在FODT上测定，在波长为328 nm处测A，平均回收率为99.8%，RSD=0.28%(表1)。 表1 回收率实验结果

　　2.2.5 样品测定 选用规格为1 mm的探头，输入样品信息，在FODT上直接将探头插入布美他尼注射液原溶液，得到溶液吸收度，使用软件系统，可直接得到溶液浓度。同时将该样品稀释5倍，在紫外分光光度计上测定吸收度，通过计算得到溶液浓度。分别测定6份溶液的浓度,折合成2 ml原溶液中含有的布美他尼的质量后进行比较。经过配对t检验，2组数据无明显差异(P>0.05)，二者均在《中国药典》含量测定结果规定的合格范围内(表2)。但本法不需要对布美他尼注射液进行稀释，在软件系统存储对照品信息的基础上，直接将探头插入布美他尼注射液原溶液，输入药品信息，仪器系统可自动给出判定结果，计算样品含量，体现了快速分析的优势。表2 含量测定结果

　　3 结论

　　从测得的图谱看，无论是对照品溶液还是样品溶液，使用紫外分光光度计和光纤传感分析设备测定的图谱一致，但FODT系统采用CCD检测器，对样品图谱的扫描瞬间完成，不用稀释，软件系统根据收载的图谱与样品图谱进行比对，快速给出判断结果，使得应用FODT系统快速分析布美他尼注射液成为可能并具有一定的实际意义。

　　采用《中国药典》规定的方法和FODT测定的方法对布美他尼注射液浓度测定的结果无明显差异。经方法学验证证实，FODT系统快速分析布美他尼注射液，对其进行初步的定性、定量分析切实可行。

　　根据FODT使用方法，软件系统可存储对照品信息(光谱图及相应参数)、药物光谱信息，进行现场药物检测时，只需将探头插入供试溶液，输入药品信息，仪器系统可自动进行光谱检索和比对，给出判定结果，同时根据样品在指定波长处的吸收值计算样品含量，实现了布美他尼注射剂的快速分析。

　　光纤传感原位分析技术实现了对布美他尼注射液的原位、快速检测，不需取样前处理，特别适合药物的现场抽检，该仪器的使用可提高药物监管的水平和提高工作的效率。

　　【参考文献】

　　[1] 刘文英. 药物分析[M].第4版.北京：人民卫生出版社，1998：339.

　　[2] 朱 滨， 陈 坚.光纤化学传感器及其在药物领域的应用[J].国外医学药学分册，1992，19(4)：209-213.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].二部.北京：化学工业出版社，2005:95.