黄芪注射液治疗扁平疣疗效观察及对外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素-2的影响

　　【摘要】 目的 观察黄芪注射液治疗扁平疣临床疗效及对外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法 78例扁平疣患者予以黄芪注射液20 mL加入5%葡萄糖注射液250 mL中静滴,1次/d,治疗4周。统计疗效,检测治疗前后扁平疣患者外周血T淋巴细胞亚群及IL-2水平。选择健康体检者70例作为正常对照组。结果 经4周治疗,有效率达94.88%。治疗前患者外周血CD4+细胞数、CD4+/CD8+比值及IL-2水平均明显低于正常对照组(P<0.01);治疗后均显著升高(P<0.01),与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 黄芪注射液治疗扁平疣具有较好疗效,能增强扁平疣患者的细胞免疫功能,并通过T细胞介导的免疫反应损伤靶细胞,达到清除疣体的效果。

　　【关键词】 扁平疣;黄芪注射液;T淋巴细胞亚群;白细胞介素-2

　　Clinical Observation of Astragalus Injection in Treating Verruca Plana and Its Effect on Levels of T Lymphocyte Subsets and IL-2 in Peripheral Blood QIU Meng, ZOU Xian-biao (Department of Dermatology, The First Affiliated Hospital, General Hospital of PLA, Beijing 100037, China)

　　Abstract：Objective To observe the clinical effect of astragalus injection and its influence on levels of T lymphocyte subsets and IL-2 in peripheral blood of patients with varruca plana. Methods Seventy-eight patients with varruca plana were injected astragalus injection 20 mL added into 5% glucose injection 250 mL for intravenous drip once a day and the treatment continued for four weeks. The therapeutic effect was observed. T lymphocyte subsets and IL-2 level in peripheral blood of patients were detected before and after treatment. Seventy healthy persons were selected as control group. Results After treatment, the effective rate was 94.88%. Before treatment, the levels of CD4+ cell numbers, CD4+/CD8+ numbers and IL-2 were significantly lower than those of healthy controls (P<0.01). These indicators were significantly increased after treatment (P<0.01), and there were no significant differences from control group (P>0.05). Conclusion Astragalus injection has good effect in treating varruca plana. It can improve cellular immunity of varruca plana patients, and damage target cell by T cell-mediated immune response, so the warts can be eliminated.

　　Key words：varruca plana;astragalus injection;T lymphocyte subsets;IL-2

　　扁平疣是由人乳头瘤病毒感染引起的皮肤病,病程长,常迁延不愈、难以根治,其发生、发展和消退与机体免疫功能异常密切相关。本研究拟通过对扁平疣患者CD4+细胞数、CD4+/CD8+比值及白细胞介素-2(IL-2)水平的测定,探讨黄芪注射液对扁平疣患者机体免疫状态的影响。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料

　　78例观察病例为2008年8月-2009年6月本院皮肤科门诊扁平疣患者,符合《杨国亮皮肤病学》[1]有关扁平疣诊断标准。其中男31例,女47例,年龄12～36岁,平均年龄23岁,病程最短3个月,最长3年;皮损发病部位大多以面部、颈部为主,少数患者皮疹发生在手部、前胸;3个月内均未经过其他抗病毒及免疫调节治疗。入选扁平疣患者均无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患,肝肾功能检验正常,不伴有自身免疫疾病及严重系统性疾病。正常对照组70例,均为本院体检中心经体检合格的健康人,男25例,女45例,年龄11～40岁,平均年龄24岁。

　　1.2 主要仪器与试剂

　　黄芪注射液(每10 mL相当于原药材20 g,成都地奥九泓制药厂生产,批号0807072),抗CD56单克隆抗体及EPICS EUTE ESP型流式细胞仪(美国Coulter公司提供),ELISA试剂盒及自动化板式酶标仪(深圳晶美生物工程有限公司提供)。

　　1.3 治疗方法

　　予以扁平疣患者黄芪注射液20 mL,加入5%葡萄糖注射液250 mL中静脉滴注,每日1次,连续治疗4周。

　　1.4 检测指标及方法

　　无菌条件下采集扁平疣患者治疗前后及正常对照组早晨空腹静脉血和肝素抗凝血各3 mL,于2 000 r/min离心,取上清液,置-20 ℃下冻存。

　　外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)的检测：取肝素抗凝血各100 ?L,分别加入20荧光素标记的抗CD56单克隆抗体,混匀后置于室温18～20 ℃下孵育15 min,加入红细胞溶解液l mL,充分混匀,待红细胞完全溶解后使用流式细胞仪进行检测。

　　血清IL-2水平的检测：采用ELISA双抗体夹心法测定。酶板平衡至室温,将不同浓度的标准品稀释液、空白及样品加入到酶板中,每孔100 ?L,每孔再加稀释好的生物素标记的抗体50 ?L,用封板膜封住反应孔,室温振荡2 h;洗板后每孔加稀释好的酶标抗体工作液100 ?L,封板30 min,弃上清液洗板;每孔加入底物A、B液各50 ?L,避光静置15 min;每孔加入终止液50 ?L,混匀后在酶标仪上测定OD492值,并获取样本浓度值。

　　1.5 疗效标准

　　根据《中医病证诊断疗效标准》[2]拟定。痊愈：疣体全部消退且无新皮损出现;显效：疣体消退70%以上;好转：疣体消退30%～70%;无效：疣体消退小于30%或无明显变化。有效率为痊愈率、显效率、好转率之和。

　　1.6 统计学方法

　　采用SPSS10.0统计软件包完成,数据用—(—用)±s表示;治疗前后比较采用配对t检验,组间比较采用成组t检验。

　　2 结果

　　2.1 临床疗效

　　78例患者痊愈54例(69.23%),显效13例(16.67%),好转7例(8.97%),无效4例(5.12%),有效率为94.88%。治疗过程中无1例患者出现不良反应。

　　2.2 对外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素-2水平的影响(见表1)表1 黄芪注射液对扁平疣患者T淋巴细胞亚群、IL-2水平的影响(—(—响)±s)

　　3 讨论

　　中医认为,扁平疣是由于肝胆血燥、气血不和,复感风热之毒,蕴阻于肌肤所致[3]。黄芪为豆科多年生草本植物,性微温,味甘,具有补气生阳、益卫固表、利水消肿、托毒生肌之功效。黄芪注射液是由黄芪提取物制成的注射剂,主要成分为黄酮、皂苷、多糖类物质,能增强和调节机体免疫功能,提高机体抵抗力[4-5]。动物实验表明,黄芪对正常小鼠免疫器官具有保护作用,可使胸腺显著增重,并能使刀豆蛋白A激发的T淋巴细胞增殖反应明显增强[6-7]。本研究显示,扁平疣患者治疗前细胞免疫功能受抑制,患者的T淋巴细胞亚群及细胞因子水平异常,表现为CD4+细胞数下降、CD8+细胞数升高(CD4+/CD8+比值下降)及IL-2水平下降,这可能是导致扁平疣反复发作的原因。黄芪注射液治疗后患者CD4+细胞、CD4+/CD8+比值及IL-2水平较治疗前显著升高,CD8+细胞水平显著下降,与正常对照组比较,差异无统计学意义。T细胞介导的免疫反应包括CD4+亚群和CD8+亚群,其中CD4+亚群参与的反应以释放多种淋巴因子,出现以单核巨噬细胞浸润为主的炎性反应,CD8+亚群参与的反应主要在病毒性感染中对靶细胞起直接杀伤作用,破坏靶细胞膜,大量水分由细胞外进入细胞内,最后细胞溶解。细胞因子IL-2主要由活化的T淋巴细胞产生,具有促进T细胞增殖和增强T细胞介导的细胞毒杀伤作用,能增强天然杀伤细胞(NK)活性,维持NK细胞长期生长,提高它们溶解和破坏病毒感染靶细胞的能力,并可以抑制病毒再生[8]。

　　综上所述,黄芪可以增强扁平疣患者的细胞免疫功能,同

　　时清除疣体,对潜伏期病毒有抑制作用,具有较好的临床疗效,且不良反应小。

　　【参考文献】

　　[1] 王侠生,廖康煌.杨国亮皮肤病学[M].上海：上海科学技术文献出版社, 2005.309.

　　[2] 国家中医药管理局.中医病证诊断疗效标准[S].南京：南京大学出版社,1994.145.

　　[3] 徐宜厚,王保方,张赛英.皮肤病中医诊疗学[M].北京：人民卫生出版社,2007.164.

　　[4] 窦 辉,付铁军,张 帆,等.黄芪注射液的化学成分[J].天然产物研究与开发,2002,14(6)：14-17.

　　[5] 甄 莉,吴 媛.黄芪注射液对银屑病外周血淋巴细胞白介素-2及其受体的影响[J].中国中西医结合皮肤病学杂志,2006,5(2)：63-65.

　　[6] Zhang RP, Zhang XP, Ruan YF, et al. Protective effect of Radix Astragali injection on immune organs of rats with obstructive jaundice and its mechanism[J]. World J Gastroenterol,2009, 15(23)：2862-2869.

　　[7] 林爱华,李予蓉.黄芪对小鼠免疫功能的影响[J].第四军医大学学报, 2003,24(17)：封2.

　　[8] Sereti I, Anthony KB, M artinez-Wilson H, et a1. IL-2 induced CD4 T-cell expansion in HIV infected patients is associated with long-term decreases in T-cell proliferation[J]. Blood,2004,104：775-780.