补肾化浊胶囊对庆大霉素诱发大鼠急性肾损害作用的实验观察

　　【摘要】 目的 探讨补肾化浊胶囊对庆大霉素(GM)致大鼠肾脏损伤时肾功能变化以及血、尿中相关指标的影响。方法 给药2l d后，采用大剂量注射GM致大鼠急性肾损伤模型，同时给予补肾化浊胶囊高、低剂量混悬液灌胃。治疗7 d，观察4组血肌酐(Cr),尿素氮(BUN、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的变化;另观察4组尿蛋白、葡萄糖、酮体的变化及肾组织的病理改变。结果 补肾化浊胶囊高、低剂量组血清中Cr、BUN、TP和ALB含量较模型组同指标比较差异有统计学意义(P<0.05);尿中尿蛋白、葡萄糖、酮体含量较模型组同指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。补肾化浊胶囊高、低剂量组的相同指标与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 补肾化浊胶囊对GM诱发大鼠急性肾损伤有显著保护作用。

　　【关键词】 补肾化浊胶囊;庆大霉素类;急性肾损伤;治疗结果

　　The experimental research of the effect of Bushenhuazhuo capsule on acute kidney injury caused by gentamicin WANG Shuhua*,YIN Xueyan*，QIU Songya.*Cangzhou Central Hospital,Hebei, Cangzhou 061001,China

　　【Abstract】 Objective To observe the effect of Bushenhuazhuo capsule on the changes of renal function and related factors in blood and urine in acute kidney injury of rats caused by gentamicin (GM).Methods After 21day administration,the acute kidney injury model of rats was induced by highdose gentamicin injection, meanwhile the rats were given highdose or lowdose Bushenhuazhuo capsule by gastric gavage. After 7day treatment,the changes of creatinine(Cr), blood urea nitrogen(BUN), total protein(TP) and albumin(ALB), urine protein, glucose, ketones and pathological changes were detected and observed.Results There were significant differences in the levels of creatinine (Cr), blood urea nitrogen (BUN), total protein(TP)and albumin(ALB), urine protein, glucose, ketone levels between Bushenhuazhuo capsule group and model group (P<0.05 or <0.01).However there were no significant differences in these parameters between Bushenhuazhuo capsule group and control group (P>0.05).Conclusion Bushenhuazhuo capsule has a significant protective effect on gentamicininduced acute kidney injury in rats.

　　【Key words】 Bushenhuazhuo capsule; gentamicin; acute kidney injury; therapeutic effect

　　补肾化浊胶囊是河北省沧州市中心医院自行研制的中药复方制剂，具有滋补肝肾、益气养阴、活血消肿、温肾健脾的功效，用于治疗糖尿病肾病取得了较好的临床疗效。本实验参照中药药理研究方法学[1]，观察补肾化浊胶囊对庆大霉素(GM)致大鼠急性肾脏病变的作用，探讨可能的机制，为补肾化浊胶囊临床预防和治疗糖尿病肾病提供依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物 SD大鼠40只，雌雄各半，体重150～200 g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。自由饮水、进食，光照时间每日9 h以上。饲养1周后使用。

　　1.2 药品与试剂 补肾化浊胶囊(沧州市中心医院制剂室提供，批号：040504)，尿素氮(BUN)检测试剂盒(批号：280221)，肌酐(Cr)检测试剂盒(批号：320431)，总蛋白(TP)检测试剂(批号：281181)，白蛋白(ALB)检测试剂(批号：251851)，以上生化制剂均由中生北控生物科技股份有限公司提供。硫酸庆大霉素注射液(天津金耀氨基酸有限公司提供,2 ml∶8万U，批号：0403022)，目测八联试纸(由广州市花都高尔宝生物技术有限公司提供生产日期：20040325)，蒸馏水。

　　1.3 仪器与设备 全自动生化分析仪(美国泰尔康公司生产TECHNICON RAl000型)，离心机，一次性注射器(5 ml、1 ml)，灌胃器，手术剪，手术镊子，一次性尖头试管。

　　1.4 药液配制 补肾化浊胶囊低剂量混悬液(108 g/L)蒸馏水配制，补肾化浊胶囊高剂量混悬液(324 g/L) 蒸馏水配制。

　　1.5 分组与用药 40只大鼠，随机分为4组，对照组、肾损伤模型组、补肾化浊胶囊高剂量组和补肾化浊胶囊低剂量组，每组10只。补肾化浊胶囊高剂量组和补肾化浊胶囊低剂量组分别灌服混悬液，按1 ml·100 g-1·d-1给药，连续4周。期间从第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1，共8 d。对照组、肾损伤模型组：每天灌服同体积水，连续4周。期间肾损伤模型组从第21天皮下注射GM 100 mg·kg-1·d-1，共8 d。4组均于末次给药2 h后，取尿和血进行测定。

　　1.6 观察指标 本实验中，尿检采用目测八联试纸半定量法测定蛋白总量、尿糖、酮体、葡萄糖、尿液pH值。大鼠取血均未麻醉，采用眼眶静脉取血3～5 ml，离心后取上层血清在全自动生化分析仪测定BUN(速率法)、Cr(苦味酸法)、TP(双缩脲法)和ALB(溴甲酚绿法)。处死后观察肾脏外观。

　　1.7 统计学分析 计量资料以±s表示，采用单因素方差分析，组间比较采用q检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 补肾化浊胶囊对尿液生化指标的影响 高、低剂量的补肾化浊胶囊能显著降低由GM导致的急性肾损伤大鼠尿中蛋白总量、尿糖及酮体，恢复尿液pH值(P<0.05)，与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。表1 4组尿液生化指标比较注：与对照组比较，*P<0.01;与肾损伤模型组比较，#P<0.05，△P<0.01

　　2.2 补肾化浊胶囊对血清生化指标的影响 高、低剂量的补肾化浊胶囊均能显著降低GM肾损伤模型大鼠BUN、Cr含量(P<0.01)，与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。高、低剂量的补肾化浊胶囊显著提高GM肾损伤模型大鼠血清TP、ALB总量(P<0.01)，较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。表2 4组血清生化指标的影响n=10，±s表3 4组血清蛋白比较注：与对照组比较，*P<0.01;与肾损伤模型组比较，#P<0.01

　　2.3 补肾化浊胶囊对大鼠肾脏器官影响的外观检查 对照组大鼠肾脏大小、形状均正常，表面光滑，暗红色，包膜菲薄无粘连，易于剥离，切面皮质与髓质纹理清楚，肾盂部位黏膜光滑，未见渗出物。模型组则比较肥大出现不同程度的渗出血，皮质与髓质间出现红斑。低剂量组有所改善，而高剂量组几乎看不到上述现象。

　　3 讨论

　　Cr、BUN是反映肾脏功能的敏感指标。有资料表明，Cr、BUN水平与机体尿酸含量呈正相关，高尿酸血症可直接导致肾脏器质性损伤并且伴有冠状动脉硬化等糖尿病并发症[2]。本研究表明补肾化浊胶囊能有效减少急性肾损伤大鼠的Cr、BUN水平，从而抑制高尿酸血症的形成，减少尿酸盐对肾脏的损害。

　　补肾化浊胶囊对尿蛋白与尿糖的影响也很明显，从实验结果可以看出，尿蛋白、尿中葡萄糖明显减少。尿中葡萄糖的减少表明补肾化浊胶囊对肾小管损伤具有修复作用。尿蛋白的减少与血液中总蛋白和白蛋白水平的上升有着密切的相关性。充分证明，补肾化浊胶囊减轻了肾损伤大鼠肾小球损害，降低了肾小球的高灌注，修复受损组织，从而减少了肾损伤大鼠肾小球对蛋白的滤过，使血浆蛋白水平趋于正常[3]。

　　糖尿病属于中医“消渴”范畴，其基本病机是气阴两虚。祖国医学认为，久病必虚，久病必瘀，久病及肾。糖尿病肾病就是糖尿病在以阴虚为本。气阴两虚为基本证型的基础上进一步发展演变而来，其基本的病理变化也是以肺、脾(胃)、肾三脏气阴亏损为主，脉络瘀阻为主要兼症而伴随始终。针对上述病机，采用益气健脾，活血消肿，滋阴补肾法而组方的补肾化浊胶囊来纠正糖尿病肾病的病理演变。方中黄芪、白术、茯苓益气健脾，以资气血生化之源，纠正气虚之本，改善糖尿病营养状况，同时可化湿利水，改善浮肿症状;山茱萸养阴滋肾，以补阴虚之本;山药补肺脾肾三脏之阴;金樱子活血化瘀，并寓利水于活血之中。现代药理研究证实，黄芪具有增强和调整免疫反应的效应，防止和逆转糖尿病大鼠蛋白尿的作用[4];白术、黄芪等又可抑制脂质过氧化，降低LPO含量，提高SOD活性[5]，拮抗氧自由基造成的肾脏微血管的损伤;能扩张血管、抗凝血、抑制血小板聚集和释放、降低血粘度、改善肾脏微循环、修复损坏的血管内膜，保护肾功能。诸药合用，既能扩张肾血管，改善肾小球的通透性，减少大分子物质的滤出，又能调整机体的免疫力，改善血液沉变性及肾脏微循环，修复微血管的损伤，从而有效地防止和减少蛋白尿。本研究结果显示有显著降低BUN、Cr及升高血清蛋白作用。补肾化浊胶囊能预防和减少糖尿病肾病尿蛋白的漏出，为治疗糖尿病肾病提供较为理想途径。对于其作用机制有待进一步研究和观察。

　　【参考文献】

　　1 陈奇主编.中药药理研究方法学.第1版.北京：人民卫生出版社，1993.101.

　　2 刘湘群.44例糖尿病患者血尿酸与血糖、尿素氮和肌酐的相关分析.当代医药卫生，2004，20：201202.

　　5 王淑花，赵丽，高俊杰，等.补肾化浊胶囊治疗糖尿病肾病105例疗效观察.中国全科医学，2009，12：17311733.

　　4 耿涛，陈兴发，盛斌武，等.黄芪丹参对高参冲击波致肾损伤保护的实验研究.现代中医，2001，49：300302.

　　5 孙朋友主编.中西医结合治疗糖尿病.第1版.哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1994.317.