注射用头孢地嗪钠有关物质方法学研究

　　【摘要】 目的：建立注射用头孢地嗪有关物质检查方法。方法：采用高效液相色谱法，以Diamonsil-C18(250mm×4.6mm×5μm)为色谱柱;流动相：磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾0.87g与无水磷酸氢二钠0.22g加水溶解并稀释至1000ml)-乙腈(90：10);检测波长：215nm。结果：有效的分离了注射用头孢地嗪钠中的有关物质，单个最大杂质峰面积不超过对照溶液主峰面积;各杂质峰面积的和不大于对照溶液主峰面积的1.5%。结论：此方法简便、快速，可用于注射用头孢地嗪钠的质量控制。

　　【关键词】 注射用头孢地嗪钠;有关物质;高效液相色谱法

　　Determination of the Related Substances

　　in Cefodizime Sodium for Injection by HPLC

　　Fu Jiying，et al

　　Harbin Gloria Pharmaceutical Co.Ltd(Harbin Heilongjiang China 150025)

　　Abstract：Objective：To determine the related compounds in Cefodizime Sodium for Injection by HPLC.Methods：The determination was performed on Diamonsil-C18(250mm×4.6mm×5μm)column，and the mobile phase was composed of methanol-solution of PBS(MKP0.87g and ADSP0.22g watering and dilution to 1000ml)-acetonitrile(90：10)and detection wavelength of 215nm.Results：The related substances in Cefodizime Sodium for Injection were separated effectively.The peak area of single foreign material was no more than the main peak area of contrast solution，and the total peak area of all foreign materials was no more than 1.5% of the main peak area of contrast solution.Conclusion：The method is simple and rapid，suitable for the quality control of Cefodizime Sodium for Injection.

　　Key words：Cefodizime Sodium for Injection;related compounds;HPLC

　　临床上许多疾病往往存在不同程度的免疫功能低下，例如肝硬化、糖尿病、大面积烧伤、各种手术后、肿瘤、血液病等，此类患者易受各种病原微生物的侵袭而引起感染。头孢地嗪钠由于它的抗菌与免疫调节的双重性，促使其在临床上得到广泛应用。它能够改变细菌细胞壁的植物血凝素样结构，从而增强人类中性细胞和单核细胞的体外杀菌能力，影响淋巴细胞，增强迟发性过敏反应，调节与炎症过程中有关的两种细胞因子即肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(IL)-1的产生，使慢性感染和免疫抑制小鼠重建产生IL-1的功能。不管是采用头孢地嗪敏感或耐受菌株，头孢地嗪对巨噬细胞的功能均会产生间接影响，如用耐药铜假单胞菌与亚抑菌浓度头孢菌素，多型核中性粒细胞(PMN)共孵育，与其它头孢类相比，头孢地嗪可诱导出更强的氧化反应，对低反应性PMN作用最强。头孢地嗪还可用以提高合并感染的肿瘤患者吞噬细胞的吞噬指数，中性粒细胞的活性以及CD4ICD～的比值，改善手术患者由于手术造成的免疫抑制，重建老年人群的多形核白细胞的吞噬能力，增强糖尿病患者中性粒细胞的超趋化作用。而且在恢复重症感染患者正常免疫水平及术后免疫恢复方面优于其他头孢类抗菌药。临床主要用于呼吸道感染、淋病感染、尿道感染、妇科感染、手术感染、脑膜炎等。本品在临床上已应用多年，取得良好疗效。由于头孢地嗪钠中杂质含量较多，因此建立HPLC法对本品的有关物质进行检查。本文通过研究建立了专属性强、简便快捷的高效液相色谱方法，可对头孢地嗪钠进行质量控制。

　　1 仪器与试药

　　岛津LC-10AT VP泵岛津SPD-10A VP紫外检测器HW-2000色谱工作站磷酸二氢钾 北京化工厂 批号2007021无水磷酸氢二钠 天津市光复精细化工研究所批号20060206乙腈(色谱纯) Honey well 批号121A1H水 自制注射用头孢地嗪钠为本公司自制样品(规格：0.5g，批号：080122、080123、080124)

　　2 试验与结果

　　2.1 色谱条件与系统适用性试验

　　色谱柱：Diamonsil-C18(250mm×4.6mm×5μm);流动相磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾0.87g与无水磷酸氢二钠0.22g加水溶解并稀释至1000ml)-乙腈(90：10);检测波长：215nm;柱温：室温;流速：1.0ml/min;进样量：20μl。

　　测定法：精密称取注射用头孢地嗪钠约25mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液;精密量取1ml置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照溶液。取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%～25%;另取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的二倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个最大杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积;各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍。在此色谱条件下，注射用头孢地嗪钠理论塔板数为2549，与其他杂质峰可达基线分离。见图1。

　　2.2 专属性试验

　　酸碱空白：取流动相5ml加1mol/L盐酸1ml加入1mol/L氢氧化钠溶液1ml，摇匀，作为酸碱破坏空白溶液。

　　对照试验：精密称取注射用头孢地嗪钠(080121)约25mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

　　酸破坏试验：取对照试验项下供试品溶液5ml加1mol/L盐酸1ml，摇匀，室温放置30分钟，用1mol/L氢氧化钠溶液调至中性，作为酸破坏试验供试品溶液。

　　碱破坏试验：取对照试验项下供试品溶液5ml加1mol/L氢氧化钠溶液1ml，摇匀，室温放置30分钟，用1mol/L盐酸调至中性，作为碱破坏试验供试品溶液。

　　高温破坏试验：取对照试验项下供试品溶液5ml置5ml量瓶中，于100℃水浴中放置30分钟，取出放冷至室温，用流动相稀释至刻度，作为高温破坏试验供试品溶液。

　　光照破坏试验：取对照试验项下供试品溶液5ml置5ml量瓶中，置于4500Lx光照条件下放置30分钟，取出用流动更昔洛韦与左氧氟沙星注射液配伍稳定性考察

　　2.3 定量限和检测限试验

　　取头孢地嗪钠对照品用流动相稀释一系列浓度，分别精密吸取20μl，注入液相色谱仪，以信噪比10：1为定量限，以信噪比3：1为检测限。结果头孢地嗪钠的定量限为3.7ng，检测限为1.0ng。见图3、4。

　　2.4 溶液稳定性试验

　　取本品(批号：080121)，加流动相制成每1ml中含0.5mg溶液，于室温(25℃)下放置，照有关物质测定方法，分别于0、2 、4 、6 、8小时测定，记录色谱图，记录色谱纯度，结果见表1。 结论：本品的有关物质在8小时内稳定。表1 供试品溶液稳定性考察结果

　　2.5 有关物质检查供试品有关物质测定结果见表2。表2 供试品有关物质测定结果

　　3 讨论

　　本品参考注射用头孢地嗪钠标准国家药品标准 WS1-(X-263)-2003Z，对其有关物质进行了研究。采用高效液相色谱法，通过专属性、定量限和检测限、溶液稳定性等研究证明本方法切实可行。流动相、检测波长均参考注射用头孢地嗪钠标准国家药品标准 WS1-(X-263)-2003Z。用高效液相色谱测定本品中有关物质，操作简便、快速，可用于注射用头孢地嗪钠的质量控制。