血清中MMP2、MMP9水平与乳头状甲状腺癌关系的分析

　　【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinases ,MMP2)及基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinases ,MMP9)与乳头状甲状腺癌的关系。方法 采用酶联免疫吸附法测定30例健康者(对照组)和30例甲状腺腺瘤患者及32例乳头状甲状腺癌患者血清中MMP2和MMP9的水平，分析其与乳头状甲状腺癌之间的关系。结果 乳头状甲状腺癌组血清中MMP2和MMP9的水平显著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组(P<0.01)。甲状腺腺瘤组和健康对照组之间没有差异(P >0. 05)。结论 血清中MMP2和MMP9水平的检测对乳头状甲状腺癌患者的诊断有重要的临床意义。

　　【关键词】 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 甲状腺肿瘤

　　SIGNIFICANCE OF MATRIX METALLOPROTEINASE2 ANDMATRIX METALLOPROTEINASE9 EXPRESSION IN SERUM OF

　　HUMAN PAPILLARY THYROID CARCINOMAS

　　Yang dan Cairang, Fan Haining, Deng Yong

　　(Hepatopancreatobiliary Surgery Department, The affiliated hospital of Qinghai Uhiversitg)

　　Abstract Objective To investigate the significance of matrix metalloproteinase9 (MMP9) and matrix metalloproteinase2 (MMP2) expression in human papillary thyroid carcinomas. Methods Expression of MMP9 and MMP2 in serum of 32 patients with papillary thyroid carcinoma 30 patients with thyroid adenoma and 30 healthy control ones were detected by ELISA respectively. Results The expression of MMP9 and MMP2 in patients with papillary thyroid carcinoma was significantly higher than that of thyroid adenoma and healthy control (P<0.01), while there was no significant difference between patients with thyroid adenoma and healthy control in the expression of MMP9 and MMP2. Conclusion The overexpression of MMP9 and MMP2 is significantly

　　Key words Matrix metalloproteinase9 Matrix metalloproteinase2 Thyroid neoplasms

　　乳头状甲状腺癌约占成人甲状腺癌的百分之六十和儿童甲状腺癌的全部，其较早出现淋巴转移但预后较好。MMP2和MMP9是Zn2+依赖的细胞外蛋白水解酶，可降解基底膜，促进恶性肿瘤细胞的侵袭和转移。本研究探讨基质MMP2、9是否可作为乳头状甲状腺癌的肿瘤标志物，用于乳头状甲状腺癌的早期诊断。

　　1 材料与方法

　　1.1 临床资料

　　选择我院2006年8月到2007年8间乳头状甲状腺癌病例23例，患者中男性10例，女性22例，年龄35～64岁，平均年龄(47.35±10.98)岁，病程(4.01±2.2)月;甲状腺腺瘤病例30例，患者中男性13例，女性17例，年龄29～60岁，平均年龄(42.96±8.67)岁，乳头状甲状腺癌组、甲状腺腺瘤组与正常对照组间性别和年龄无统计学差异(P>0.05)。病程(2.08±0.4)月。乳头状甲状腺癌组、甲状腺腺瘤组病程无统计学差异(P>0.05)。所有病人均行B超、颈部CT检查证实有甲状腺结节，手术切除标本经病理确诊;患者均无高血压、冠心病、脑血管意外、糖尿病、肺结核和其他系统肿瘤，并无近6个月内的手术史。选择健康体检者30例作为正常对照组，男、女各15例，平均年龄(41.65±7.99)岁。

　　1.2 主要试剂和仪器

　　MMP2和MMP9 ELISA kit 为美国R&D公司产品;ELx800酶标仪为美国BioTEK公司产品;5417R低温高速离心机为德国Eppendorf公司产品。

　　1.3 标本

　　受试者过夜禁食12 h,清晨空腹抽肘静脉血6 ml,所有甲状腺病人均于术前抽血，室温静止30 min后离心(3000r/min)15 min，分离血清，取3 ml置于80℃冰箱备测MMP2和MMP9，所有血清均统一编号保存，各项指标均统一标准，一批完成检测。

　　1.4 检测方法

　　MMP2和MMP9用ELISA法测定。严格按产品说明操作。

　　1.5 统计学方法

　　所有数据均采用SPSS11.5统计软件进行处理，实验结果以x±S表示，用SPSS11.5软件进行统计分析。组间均数比较采用单因素方差分析(oneway ANOVA),有显著差异者用StudentNewmanKeuls q检验进行两两比较，相关性分析采用Pearson相关分析法，检验水准α = 0.05。

　　2 结果

　　各组血清中MMP2和MMP9水平检测结果见表1。表1各组血清中MMP2、MMP9水平结果注 *与正常对照组、甲状腺腺瘤组比较均P<0.01.

　　表1显示，乳头状甲状腺癌组血清中MMP2、MMP9水平与甲状腺腺瘤组和正常对照组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。甲状腺腺瘤组血清中MMP2、MMP9水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。乳头状甲状腺癌组血清中MMP2、MMP9水平间呈高度正相关(相关系数为0.89，P<0.05)。

　　3 讨论

　　近年来，肿瘤侵袭与转移的分子生物学机制不断地被人们深入了解，许多反映肿瘤侵袭转移的细胞因子被纳入到研究范围中，如黏附分子、基质金属蛋白酶、促血管生长因子等，其中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是诸多研究因子中的热点之一[1]。MMPs是参与细胞外基质降解的蛋白酶家族，它能降解除多糖以外的几乎全部ECM成分。基质金属蛋白酶在细胞外基质动态平衡、组织重塑、修复等病理生理过程中起重要作用[2]。有关MMPs与甲状腺癌的研究主要集中在乳头状甲状腺癌上，MMP2和MMP9是Zn2+依赖的细胞外蛋白水解酶，可降解基底膜，促进恶性肿瘤细胞的侵袭和转移[3]。MMPs与肿瘤浸润转移的关系己被MMPs基因转染技术所证实，将基质溶素和MTMMP完整cDNA导入无转移潜能或转移潜能较弱的细胞后，转染细胞侵袭和转移能力大大提高;反之，将MMPs的反义核酸导入高侵袭转移潜能的细胞后，可使其侵袭转移表型减弱[4]。Cho等[5]研究发现：乳头状甲状腺癌MMP7、MMP9表达水平显著高于甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织。Baldini E等[6]的研究结果显示，血清中MMP2水平在乳头状甲状腺癌组明显高于甲状腺腺瘤组和正常对照组，有显著性差异;甲状腺腺瘤组和正常对照组之间无明显差异。

　　研究结果提示，乳头状甲状腺癌组血清中MMP2和MMP 9的水平显著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组,MMP2和MMP9可能与甲状腺癌的发生和发展有关，实验研究结果与Komorowski[7]结果基本一致。因此可通过血清中MMP2、MMP9水平的检测来诊断乳头状甲状腺癌，一般血清中MMP2水平大于898.20ng/ml、血清中MMP9水平大于270.21ng/ml时，可用来鉴别甲状腺良恶性。对于甲状腺滤泡状癌、甲状腺髓样癌血清中MMP2,MMP9水平检测是否也能鉴别甲状腺良恶性，还需要进一步研究明确。

　　【参考文献】

　　[1]Visse R，Nagase H.Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinasesl structure，function，and biochemistry[J].Circ Res，2003，92 (8)：827839

　　[2] Tayebjee MH,Lim HS,MacFadyen RJ，et al.Matrix metalloproteinase9 and tissue inhibitor of metalloproteinase1 and2 in type 2 diabetes： effect of 1 year's cardiovascular risk reduction therapy[J]. Diabetes Care，2004，27：20492051

　　[3]Komorowski J, Pasieka Z, JankiewiczWika J,et al. Matrix metalloproteinases, tissue inhibitors of matrix metalloproteinases and angiogenic cytokines in peripheral blood of patients with thyroid cancer [J].Thyroid， 2000,12(8):655662

　　[4]Yeh MW, Rougier JP, Park JW, et al. Differentiated thyroid cancer cell invasion is regulated through epidermal growth factor receptordependent activation of matrix metalloproteinase (MMP)2[J]. Endocr Relat Cancer, 2006, 13(4):117383

　　[5]Cho Mar K,Eimoto T,Tateyama H,et al. Expression of matrix metalloproteinases in benign and malignant follicular thyroid lesions[J]. Histopathology, 2006, 48(3): 286 –294

　　[6]Baldini E, Toller M, Graziano FM,et al . Expression of matrix metalloproteinases and their specific inhibitors in normal and different human thyroid tumor cell lines[J]. Thyroid, 2004,14(11):881888

　　[7]Komorowski J, Pasieka Z, JankiewiczWika J,et al.Matrix metalloproteinases, tissue inhibitors of matrix metalloproteinases and angiogenic cytokines in peripheral blood of patients with thyroid cancer[J].Thyroid， 2002,12(8):655662