妊高征TGF-β1及MMP-2在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

　　【摘要】 目的 检测胎盘组织中转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-beta1,TGF-β1)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2，MMP-2)的表达，探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法 用免疫组化法对20例正常孕妇和40例妊娠期高血压疾病患者(其中妊娠期高血压20例，子痫前期轻度10例、重度10例)胎盘中TGF-β1和MMP-2进行检测。结果 妊娠期高血压疾病患者胎盘中TGF-β1的表达明显高于正常妊娠组(P<0.01)，而MMP-2的表达明显低于正常妊娠组(P<0.05)。结论 胎盘组织中TGF-β1的表达升高以及MMP-2的低表达与妊娠期高血压疾病的发病有关。

　　【关键词】 TGF-β1 MMP-2 妊娠期高血压疾病 胎盘

　　Expression and Significance of TGF-β1 and MMP-2 in Placenta of Patients with Hypertensive Disorder Complicating Pregnancy

　　Yang Yabin, et al.

　　(The Fifth Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Daqing 163316 China)

　　【Abstract】 Objective To detect TGF-β1 and MMP-2 in the placenta in order to evaluate the relation of TGF-β1 and MMP-2 with hypertensive disorder complicating pregnancy. Methods TGF-β1 and MMP-2 expression in twenty normal and forty hypertensive disorder complicating pregnancy placenta (20 cases of hypertension complicating pregnancy,10 cases of mild and 10 cases of severe preeclampsia)was detected by immunohistochemistry. Results The TGF-β1 expression levels in hypertensive disorder complicating pregnancy group were all significantly higher than those of normal pregnancy group(P<0.01)，but the MMP-2 were all significantly lower(P<0.05).Conclusions The elevated expression of TGF-β1 and the decreased expression of MMP-2 in the placenta may play an important role in hypertensive disorder complicating pregnancy.

　　【Key words】 TGF-β1 MMP-2 Hypertensive disorder complicating pregnancy Placenta

　　妊娠期高血压疾病的病因目前尚不明确，但其发病机制主要与滋养细胞功能异常有关[1]。TGF-β1是一类多功能的细胞因子，国外已证实[2-3]，TGF-β1对胎盘滋养细胞浸润有调节能力，能够影响胎盘发育。而MMP-2在滋养细胞侵蚀过程中发挥重要的作用。本研究通过免疫组化法检测胎盘组织中TGF-β1及MMP-2表达的特点及其相关性。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象

　　选择2006年8～12月在我院住院患者剖宫分娩的妊娠期高血压疾病患者40例，其中妊娠期高血压20例，子痫前期轻度10例，重度10例。平均年龄(29.3±1.9)岁，平均孕周为(37.6±1.6)周。妊娠期高血压疾病的诊断及分类标准参照乐杰主编《妇产科学》第六版[4]。随机选取同期住院分娩的健康足月孕妇20例为对照组，平均年龄(28.8±1.7)岁，平均孕周为(38.2±1.4)周。各组均无其他产科并发症及妊娠合并症。两组孕妇年龄及孕周比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

　　1.2 方法

　　胎盘娩出后，立即取胎盘母体面中央绒毛组织约1.0cm×1.0cm×1.0cm大小、无钙化、无机化的胎盘组织。用生理盐水冲掉血液，然后置于10%的甲醛中固定6~12h,常规脱水，石蜡包埋，4℃保存。

　　1.3 试剂

　　TGF-β1免疫组化染色试剂盒由美国生物技术公司提供;MMP-2免疫组化试剂盒、DAB染色试剂盒由北京中山生物技术有限公司提供。阳性结果判断标准：标本组织细胞中有(棕)黄色颗粒沉着。

　　1.4 统计学分析

　　分别将各组病例的TGF-β1、MMP-2的阳性率用χ2和P检验。

　　2 结果

　　2.1 TGF-β1在胎盘组织中的表达强度比较

　　妊娠期高血压组与正常妊娠组相比TGF-β1表达强度差异无显著性意义(χ2=1.867,P>0.05)。子痫前期轻度组与正常妊娠组相比TGF-β1表达强度差异有显著性意义(χ2=8.625,P<0.05)。子痫前期重度组与正常妊娠组相比TGF-β1表达强度差异有极显著性意义(χ2=15.45,P<0.01)。妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组相比TGF-β1表达强度差异有极显著性意义(χ2=13.0,P<0.01)。随着妊娠期高血压疾病病情的加重，TGF-β1的阳性表达率呈逐渐增强趋势。见表1。表1 两组孕妇TGF-β1在胎盘组织中的表达强度比较(略)

　　2.2 MMP-2在胎盘组织中的表达强度比较

　　妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有显著性意义(χ2=9.33，P<0.05)。妊娠期高血压组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异无显著性意义(χ2=1.149，P>0.05);子痫前期轻度组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有显著性意义(χ2=9.17，P<0.05);子痫前期重度组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有非常显著性意义(χ2=18.10，P<0.01)。随着妊娠期高血压疾病病情的加重，MMP-2的阳性表达率呈逐渐降低趋势。见表2。表2 两组孕妇MMP-2在胎盘组织中的表达(略)

　　3 讨论

　　妊娠期高血压疾病是引起母儿死亡的主要原因之一，其病因至今不明。近年来许多研究表明，滋养细胞功能异常在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用。胎盘-滋养细胞缺血学说是当今研究的一个热点，即在妊娠期高血压疾病发生子宫螺旋小动脉生理重铸过程障碍，此病理现象也称为“胎盘浅着床”，导致胎盘灌注不足，即胎盘缺陷。研究发现其与胚胎着床过程中滋养细胞浸润能力受累有关。MMPs是一族具有降解细胞外基质(ECM)成分特性的锌、钙依赖性的内肽酶，在人体内分布很广，参与血管形成等组织重建和许多病理过程，如肿瘤浸润、炎症反应等。MMPs对ECM的降解是滋养细胞侵袭的限速步骤，其分泌的多少将影响滋养细胞对子宫肌层的浸润程度和血管重铸。MMP-2，又称明胶酶 A(gelatinase A)，是人体内分布最广泛的 MMP。MMP-2能够特异性地降解基底膜的主要成分 IV型胶原，而基底膜是滋养细胞侵入的第一道细胞屏障。本研究结果显示，妊娠期高血压疾病患者胎盘滋养细胞 MMP-2 表达与正常妊娠胎盘相比显著下降(χ2=9.33,P<0.05)，且在妊娠期高血压、子痫前期中度、子痫前期重度组中递减，随着病情严重程度的加重有逐渐下降的趋势，这也就体现了妊娠期高血压疾病患者滋养细胞浸润能力的下降，提示我们妊娠期高血压疾病患者可能是由于滋养细胞合成和分泌 MMP-2 降低，使得滋养细胞的浸润性受到了限制，从而导致了绒毛的发育不良和螺旋小动脉的“血管重铸障碍”。TGF-β1是由多种细胞分泌的细胞因子，以自分泌或旁分泌的方式调节细胞生长、分化以及ECM的产生，广泛参与各种病理生理过程。它在子宫内膜、妊娠早期蜕膜组织、胚胎、胎盘均可产生。TGF-β1及其受体TGFβR(以TGFβRⅡ为主)参与了母-胎之间的相互作用，并以负性作用调节胎盘滋养细胞的侵入。妊娠期高血压疾病时TGF-β1表达升高(阳性率为70%)，提示在妊娠期高血压疾病发病过程中TGF-β1可调节滋养层细胞的增殖和分化，影响胎盘的着床和发育。TGF-β1通过诱导滋养层细胞纤溶酶原激活抑制因子(PAI)释放，来抑制MMP-2和组织激酶(PA)的活性，从而抑制细胞外基质的分解，抑制滋养细胞的浸润[6]。滋养细胞浅浸润则使子宫肌层螺旋动脉未发生血管重塑，这可能是导致妊娠期高血压疾病的原因之一。妊娠期高血压疾病是导致孕产妇和围产儿病率及死亡率升高的主要原因之一，其病因和发病机制还不完全清楚。单独从某一方面研究TGF-β1和MMP-2与妊娠期高血压疾病的关系是不全面的。随着分子生物水平上的进一步研究，有望揭示妊娠期高血压疾病的确切发病机制，并为妊娠期高血压疾病的防治提供新的途径。

　　【参考文献】

　　[1]Roberts JM..Preelampsia:What we know and what we dnot know[J].Sem in Perintol,2000,24(1):24

　　[2]Schilling B,Yeh J.Transforming growrh factor-beta(1),-beta(2),-beta(3)and their typeⅠand Ⅱreceptors in human term placenta[J].Gynecol Obstet Invest,2000,50(1):19-23

　　[3]Benian A,Madazli R,Aksu F,et al.Plasma and placental levels of interleukin-10,transforming growth factor-beta,and epithelial-cadherin in preeclampsia[J].Obstet Gynecol,2002,100(2):327-331

　　[4]乐杰.妇产科学[M].第6版.北京：人民卫生出版社，2004：99

　　[5]Whiteside EJ,Jackson MM,Herington AD,et al.Matrix metal-proteinase and tissue inhibitor of metalloproteinase-3 are key regulators of extracellular matrix degradationouse embryos[J].Biol Reprode,2001,64(4):131

　　[6]Xu G,Chakrborty C,Lala PK.Restoration of TGF-beta regulation of plasminogen activator inhibitor-1in Smad3-restituted human choriocarcinoma cell[J].Biochem Biophys Res Commun,2002,294(5):1079-1086